Introduction
Transplantatie van solide organen zoals huid, hart en nieren is nu een standaard procedure in de medische praktijk wereldwijd 1. Succesvol getransplanteerde organen kan door activering van de ontvanger immuunsysteem, die de major histocompatibility antigenen van de donor herkent worden afgewezen. Daarom getransplanteerde patiënten moeten de behandeling met immunosuppressieve geneesmiddelen 2. Allogene huidtransplantatie bij muizen werd vastgesteld Medawar en collega's in 1955 en is nuttig voor het identificeren van gerichte moleculen later beschreven major histocompatibility complex (MHC) klasse I en II. Sindsdien heeft de huidtransplantatie model voortdurend gemodificeerd en aangepast aan de rol van T-cel subsets en de relevantie van chemische en biologische interventie bij het onderdrukken van transplantaatafstoting 2-4 bestuderen. Huid van het oor en de romp zijn moeilijker te bereiden en zijn meer vatbaar voor hypoxie en necrose dan staartstuk 5; echter,transplantatie procedure gelijk. Naast het toezicht op de staart-huidtransplantaties is eenvoudig te wijten aan de karakteristieke haar textuur van de huid.
Dit artikel geeft een gedetailleerde procedure voor MHC klasse II mismatch staart-huidtransplantatie dat zorgt voor de studie van de verschillende aspecten van CD4 + T-cel gemedieerde allograft afstoting en tolerantie bij muizen. De natuurlijke drie-puntmutatie in de MHC klasse II molecuul IA b (de zogenaamde IA BM12) 6-9 is voldoende om afstoting van de huid allotransplantaten induceren in C57BL / 6 muizen 8. De IA BM12 molecuul activeert CD4 + T-cellen met verschillende αβ-T-celreceptor (TCR) ketens van C57BL / 6 muizen, waaronder Vα2Vβ8 TCR-specifieke T-cellen werden geïdentificeerd om een TcR-transgene muizen 10 genereren. De adoptieve overdracht van Vα2Vβ8-TcR T-cellen is gebruikt om afstoting model vast te stellen bij immunodeficiënte C57BL / 6 RAG2 - / - muizen getransplanteerd met IA BM12 huid.
Genetische verschillen tussen donor en ontvanger beïnvloeden het resultaat van transplantaat-acceptatie en afwijzing. Er zijn verschillende soorten transplantaties: autografts zijn transplantaties van het ontvangende individu zelf; syngrafts en allotransplantaten respectievelijk transplantatie van genetisch identiek en genetisch niet verwante individuen. Aanvaarding van verschillende allogene orgaantransplantaties is aangetoond door chemische en biologische interventie bij patiënten en muismodellen 11,3,4. In een fundamentele aanpak, anti-CD3-antilichaam behandelde C57BL / 6 muizen bleek langdurige overleving van IA BM12 staart-huid (ongepubliceerde gegevens). Depletie van CD4 + en CD8 + T-cellen voor transplantatie in ontvangende muizen resulteerde in aanvaarding van MHC klasse I en II mismatched transplantaten (rev. in 12). Interessant afwijzing van huidtransplantaties afhankelijk van de aanwezigheid van CD4 + 12). In dit model, gericht op specifieke interacties tussen verschillende immune cellen door het blokkeren costimulatoire moleculen met antilichamen of onderdrukking van regulatoire T-cellen kan tolerantie (ongepubliceerde gegevens) induceren. Inderdaad, het blokkeren van zowel CD40 en CD28 leidde tot lange termijn huid allotransplantaat tolerantie 13,14.
Staart-huidtransplantatie is eenvoudig uit te voeren en gemakkelijk te controleren in vergelijking met transplantatie van andere organen. Bovendien staart-huidtransplantaten gemakkelijk te bereiden en zijn minder gevoelig voor ischemie dan andere huidweefsels. In tegenstelling tot geïnjecteerde anesthetica, het gebruik van anestheticum gas (isofluorane) tijdens transplantatie verkort zowel de procedure en ontvanger hersteltijd. Krullen van de staart-huidtransplantatie, wat kan leiden tot onvolledige wondgenezing en transplantaatafstoting, wordt voorkomen door toepassing van weefsellijm. Bovendien is de IA BM12 staart-huidtransplantatie model activeert CD4 uitsluitend Dit protocol beschrijft een betrouwbaar, reproduceerbaar en gemakkelijk gevolgd muismodel waarmee chemische en biologische interventie. Het model is bedoeld voor het onderzoeken van afwijzing en tolerantie inductie van staart-huidtransplantaties.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
In deze video publicatie en protocol, werden alle dierlijke procedures uitgevoerd in overeenstemming met het dier protocol door de kantonrechter Autoriteit Basel-Stadt, Zwitserland goedgekeurd. Voer alle procedures in steriele omstandigheden waar.
1. Voorbereiding van de Chirurgie
- Autoclaaf alle chirurgische instrumenten en gaas voor gebruik.
- Verwarm de warme pad en organiseren chirurgische instrumenten op de tafel (tabel of Materials / Methoden).
- Open de vinger strip bandages. Vaseline op de wond pad met een wattenstaafje (zorg ervoor dat het gaas is volledig bedekt).
- Weeg de muizen en beheren analgesie Buprenorfine 0,05 mg / kg lichaamsgewicht. Let op: dit zal analgesie onmiddellijk na de transplantatie.
2. Voorbereiding van de Staart-huid voor transplantatie
- Euthanaseren donormuizen (bijv. IA BM12) per CO 2 stikken en disinfect de staarten met desinfectie oplossing voor excisie.
- Plaats de staart met de zwarte streep op een schone plastic bord en snijd hem overlangs in heel de middelste lijn, waardoor een oppervlakkige incisie waarbij slechts de huidlaag.
- Trek het vel van de staart met behulp aangrijpend tang.
- Zet de staart-huid in een 10 cm celkweek schotel gevuld met 10 ml HBSS.
3. Chirurgische Procedure
- Verdoven ontvangende muizen (bijvoorbeeld C57BL / 6) door inademing van een 3% oplossing isofluorane transparante inductie vak. NB: Het duurt 3-5 minuten voor de muis om chirurgische anesthesie vliegtuig te bereiken. Gebruik dierenarts zalf op de ogen tot droog voorkomen terwijl onder verdoving.
- Plaats de muis op de warme pad en toepassing 1,5% isofluorane via een mondmasker en ezels elk dier reflex door teen knijpen.
- Scheer de dorsale site van de ontvangende muizen (bijv. C57BL / 6) en verwijder besmetten haren met een droog gaasje swab.
- Desinfecteer geschoren transplantatie site met aseptische oplossing.
- Knijp de huid met een tang in het midden / rechts site van het dorsale gedeelte en gebruik gebogen schaar om een ronde insnijding van ongeveer 1 x 0,6 cm maken.
- Als bloeden optreedt, dan is het reinigen van de wond met een steriel wattenstaafje.
- Evalueer de grootte van de incisie en snijd een transplantatie van de geschatte omvang van de staart-huid met behulp van de scalpel.
- Trim hoeken om de transplantatie te ronden.
- Laad de transplantatie op de scalpel, droge overmaat HBSS op een steriel wattenstaafje en plaats deze in het transplantaat bed van de ontvanger muis.
- Vermijd overlapping van donor en gastheer huid en weefsel toe te passen lijm op de contact zone uitsluitend.
- Breng een pleister zonder plooien rond de muis taille.
- Breng de lijm niet-elastisch verband om de pleister vast aan de muis (3 mm verschoven).
- Incise met de schaar ongeveer 3 mm in de bovenste ventrale plaats van het verband. Opmerking: Dit is om te voorkomen dat trapping van de tanden van de muis tijdens de herstelfase.
- Verwijder de narcose-mond-masker en houden de getransplanteerde muizen op de verwarming pad totdat wakker.
- Terug getransplanteerde muizen om hun kooien wanneer volledig hersteld en beoordelen hun mobiliteit zodat het verband niet te strak.
- Steriliseren alle chirurgische instrumenten met 70% ethanol, alvorens volgende operatie.
4. Postoperatieve zorg
- Add-paracetamol bevattende siroop aan het drinkwater (4 mg / ml) en toedienen gedurende 7 dagen.
- Terug muis om het dier kamer als het eenmaal is hersteld.
- Nauwlettend toezien op muizen voor klinische symptomen, zoals depressie of andere gedragsveranderingen (eten of immobiliteit), abnormale verschijning (gebrek aan verzorging) of houding (pilo-erectie of gebogen houding) voor de tijd dat het verband op zijn plaats is (1 week).
5. Bandage verwijderen (6-7 dagen na transplantatie)
- Anesthetize muizen door inhalatie van een 3% isofluorane oplossing in een doorzichtige doos inductie (zie hierboven).
- Knip verband en gips met slagader schaar en verwijder voorzichtig hen. Opmerking: vermijd het uitrekken van de transplantatie plaats.
- Bewaken van de getransplanteerde muizen op klinische tekenen (zie 4.3) en de score voor de afwijzing van huidtransplantaties (tabel 1). Opmerking: Het transplantaat score systeem maakt gebruik van de verschillende haartexturen op de staart-huid in vergelijking met de dorsale huid. Het uiterlijk van de transplantatie en de afwijzing is ingedeeld in 3 klassen. Allogene huid (MHC II mismatch, bijvoorbeeld, IA BM12) enten van C57BL / 6 immunocompetente muizen worden meestal binnen 12-15 dagen na de transplantatie (eigen gegevens en 15-20) verworpen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
In een eerste benadering werden C57BL / 6 muizen getransplanteerd met IA BM12 allografts en IA b syngrafts. Na bandage verwijdering, ent manifeste tekenen van wondgenezing zonder sluiting van het contact zone in C57BL / 6 muizen (figuur 1A). Na verwijdering bandage, CD4 + T-cellen gemedieerde ontsteking leidde tot het ontstaan van necrotische gebieden (rode stippen) en afstoting van allografts IA BM12 in C57BL / 6 muizen binnen 13 dagen na transplantatie (Figuur 1B-C, gevulde symbolen), terwijl syngrafts werden getolereerd voor maximaal 100 dagen (Figuur 1B-C, open symbolen). Deze gegevens tonen aan de progressie van acute afstoting van IA BM12 transplantaten bij immunocompetente C57BL / 6 muizen.
Verschillende studies tonen aan dat de afwijzing van MHC klasse II mismatched staartstuk afhankelijk van de aanwezigheid van allogène CD4 + T-cellen (rev. in 12). Inderdaad, T-cel deficiënte CD3e - / - </ Sup> muizen en T-en B-cellen deficiënte RAG2 - / - muizen vertoonden volledige wondgenezing en getolereerd de IA BM12 ent tot 100 dagen (figuur 2), terwijl C57BL / 6 muizen afgewezen enten binnen 13 dagen (Figuur 2) . De aanvaarding van IA BM12 verkeerde staartstuk maakt de studie van allogene CD4 + T-cellen en hun effectorfuncties in een muismodel zonder ernstige ziekte pathologieën.
/ - - En RAG2 - de vastgestelde tolerantie breken CD3e / - muizen CD4 + T-cellen werden adoptief overgebracht: 2 x 10 4 polyklonale C57BL / 6 CD4 + T-cellen voldoende waren om afstoting van transplantaten IA BM12 veroorzaken binnen 14 dagen ( gegevens niet getoond). Overdracht van 50.000 en 100.000 C57BL / 6 CD4 + T cellen niet versnellen transplantaatafstoting proces CD3e - / - en RAG2 - / - muizen. Deze gegevens onderstrepen de rol van allogenEIC CD4 + T cellen in de huid acute transplantaatafstoting model.
Het voordeel van deze staart-huidtransplantatie model is dat functionele analyse van CD4 + T-cellen gemakkelijk kan worden gedaan door adoptieve overdracht van antigeen-specifieke CD4 + T-cellen. De transgene muis ABM 9 wordt als een ideaal instrument voor de activering en de fenotypische gedrag van de populatie, zonder de invloed van niet-specifieke CD4 + T-cellen af te bakenen. De overdracht van 2 x 10 4 antigeenspecifieke ABM cellen voldoende om afstoting van transplantaten IA BM12 in RAG2 induceren - / - muizen binnen 13 dagen (Figuur 3A-B). Bovendien ABM cellen gemakkelijk te isoleren en kan worden gevolgd met de expressie van de Vα2Vβ8-TCR-ketens (Figuur 3C). ABM celproliferatie en productie van cytokinen in IA BM12 getransplanteerde RAG2 - / - muizen werden onderzocht. ABM cellen verspreid extensitief bepaald door eFluor670 verdunningstest (Figuur 3D) en tot 30% van het ABM cellen die IFN-γ upon PMA-stimulering (figuur 3E).
Samengenomen tonen deze gegevens dat relatief weinig allogene CD4 + T-cellen zijn vereist om afstoting van huidtransplantaten IA BM12 veroorzaken zodat dit model ideaal voor de analyse van allogene T-cellen met minimale ernstige pathologie.
Figuur 1. Transplantatie van muizen met allogene en syngene staart-huid. (A) C57BL / 6 muizen getransplanteerd met allogene (IA BM12) en syngene (IA b) staartstuk (n = 5 per groep). Foto's illustreren allografts (links) en syngrafts (rechts) na bandage verwijdering op dag 7. (B) Scoring en (C)overleving van de huid ent van dag 7 tot dag van afwijzing of na afloop controle (dag 100). Klik hier om een grotere versie van deze afbeelding te bekijken.
. Figuur 2 Allografts getolereerd bij afwezigheid van T-cellen bij muizen Overleving van RAG2 -. / - IA BM12 - mouse skin grafts getransplanteerd in C57BL / 6, CD3e - / - en RAG2 - / - muizen (n = 4-6 per groep) en illustratie van afgewezen en geaccepteerd enten. Klik hier om een grotere versie van deze afbeelding te bekijken.
. Figuur 3 Anti-IA BM12 specifieke CD4 + T-cellen prolifereren en IFN-γ tijdens afstoting van het transplantaat (A) Scoring en (B) de overleving van IA BM12 staart-huidtransplantaties in RAG2 -. / - Muizen (n = 5) adoptief overgedragen met 2 x 10 4 antigeenspecifieke ABM cellen. (C) Vα2Vβ8-kleuring van ABM cellen geïsoleerd uit lymfklieren van transgene muizen ABM. (D) eFluor670 verdunning van ABM prolifererende cellen en (E) IFN-γ productie van PMA- gestimuleerde ABM cellen geïsoleerd uit lymfeknopen van IA BM12 huid geënt RAG2 - / -. muizen op dag 9 na adoptieve ABM cel overdracht (n = 5 muizen) Klik hier om tebekijk een grotere versie van deze figuur.
| Graft Score | Beschrijving |
| 3 + | Geen rode gebieden en de aanwezigheid van een glanzende zwarte streep |
| 2 + | Uiterlijk van de kleine rode gebieden, verlies van een glanzende zwarte streep en droogte |
| 1 + | Ontstaan van grote rode gebieden, geen zwarte streep en krimp |
| 0 | Transplantaatafstoting gedefinieerd als 80% necrose |
Tabel 1. Graft score systeem. Het uiterlijk van de transplantatie en de afwijzing is categecategoriseerde in 3 klassen, te profiteren van de verschillende haartexturen op de staart-en dorsale huid.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Huidtransplantatie is een veel gebruikte werkwijze voor het bestuderen afstoting en tolerantie afhankelijk van T-cellen. Aangezien de huid transplantatie model werd opgericht, hebben diverse aanpassingen en wijzigingen zijn toegepast. In de beschreven procedure, is IA BM12 staart-huidtransplantatie uitgevoerd met behulp van narcosegas (isofluorane). Het gebruik van gas verdoving vermindert de tijd van uitvoering en muizen herstel, dat de stress vermindert op getransplanteerde muizen. De procedure maakt gebruik van weefsel lijm aan de staart-huid, die de neiging heeft om meer dan oor of dorsale-huidweefsel krullen lossen. Bovendien is het belangrijk het staartstuk voor het snijden en trimmen van de randen als dit vermindert het krullen en verbetert positionering van de staart-huid op het dorsale excisieplaats plat.
Transplantaatafstoting of aanvaarding bepalen is het nodig om de staart-huid met de zwarte streep (bijvoorbeeld in C57BL / 6 muizen) bereiden in het midden van het transplantaat doelpunt tra vergemakkelijkennsplants gebaseerd op haar textuur verschillen.
De mutatie van het MHC klasse II molecuul IA BM12 uitsluitend activeert CD4 + T-cellen in immunocompetente en immunodeficiënte muizen (van dezelfde genetische achtergrond). Enerzijds vergemakkelijkt de interpretatie van de resultaten, maar anderzijds het beperkt de methode om CD4 + T-cellen onderzoeken. Naar T cel activatie te breiden naar andere T-cel subsets, staart-huid van andere donoren, bijvoorbeeld, dezelfde genetische achtergrond met inbegrip van IA bm1 muizen en verschillende genetische achtergrond met inbegrip van Balb / c of DBA muizen kunnen worden getransplanteerd.
In de acute afstoting studies profiteren we van de natuurlijk voorkomende mutatie in de MHC klasse II groef en de activatie van allogene CD4 + T-cellen om orgaanafstoting bij muizen. C57BL / 6 muizen afgewezen IA BM12 huidtransplantaties binnen 14 dagen na de transplantatie, die in overeenstemming is met de meeste studies using IA BM12 huidtransplantaties 15-20. Naast de acute afstoting model wordt veel gebruikt om de potentiële allogene CD4 + T-cellen van gen-deficiënte muizen te testen. Inderdaad, IFN-γ - / - muizen vertoonden vertraagde IA BM12 skin transplantaatafstoting (ongepubliceerde gegevens en 16). Blokkering IFN-γ door toediening van blokkerend antilichaam evenzeer vertraagd afwijzing 15,17,18. Dit duidt op een belangrijke rol van IFN-γ in initiëren MHC klasse II expressie op Ag-presenteren en endotheelcellen (rev. in 12). Aangezien perforine-deficiënte muizen IA BM12 achtergrond transplantaatafstoting 21 niet vertragen, de rol van cytokinen lijkt belangrijk te zijn afwijzing. Inderdaad, IL-6 toediening resulteerde in verlengde transplantaatoverleving, eventueel door neerwaarts reguleren IFN-γ-productie 15. Bovendien neutrofielen lijken een belangrijke rol spelen bij de afstoting van huidtransplantaten IA BM12 IL-4-deficiënte muizen 19 BM12 entverwerping bij muizen 20. Toediening van anti-CD3 antilichaam vertragingen IA BM12 huid entverwerping in immunocompetente muizen (ongepubliceerde gegevens). Bovendien hebben we aangetoond dat T-cel deficiënte CD3e - / - en RAG2 - / - muizen accepteren de allogene huidtransplantaties voor maximaal 100 dagen. Speling in deze muizen kunnen eenvoudig worden teruggedraaid / gebroken door adoptieve overdracht van CD4 + T-cellen uit immuuncompetente C57BL / 6 muizen. Overdracht van 2 x 10 4 CD4 + T-cellen en antigeen-specifieke ABM cellen volstaat IA BM12 transplantaatafstoting rond dag 14 induceren. Geïsoleerd Vα2Vβ8 ABM-positieve cellen vertoonden uitgebreide proliferatie en IFN-γ productie in de lymfeknopen voor afwijzing echter afwijzing was afhankelijk van I-Abm12 expression in de huidtransplantatie.
Kortom, dit muismodel is een uitstekende manier om de activering van lage T-cel aantallen tijdens afwijzing of tolerantie te bestuderen. De staart-huidtransplantatie is eenvoudig uit te voeren en kan worden toegepast op muizen met verschillende genetische achtergronden van de allogene responsen van T-cellen te bestuderen zonder dat ernstige fysiologisch effect. Bovendien is dit model is ideaal voor interventies met chemische en biologische stoffen induceren of breken huidtransplantatie tolerantie.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Betadine standard solution | Mundipharma | ||
| Cotton swab | Carl Roth GmbH | 31025060 | |
| Dafalgan , UPSA | Bristol Myers Squibb UPSA | ||
| Hansaplast finger strips | Beierdorf AG | REF.76861 | |
| Histoacryl tissue adhesive | Braun | REF.1050052 | |
| Leukotape classic , 2 cm x 10 m | BSN Medical SAS | REF.02204-00 | |
| PBS, Phosphate Buffered Saline, pH 7.4 | Invitrogen | 10010015 | GIBCO |
| Sterile gauze, 5 x 5 cm, 8 ply | MaiMed GmbH | 21010 | |
| Narrow pattern forceps | FST | 11003-12 | |
| Fine iris scissor curved | FST | 14095-11 | |
| Fine iris scissor | FST | 14094-11 | |
| Mayo scissors | FST | 14010-15 | |
| Artery scissors ball tip 11.5 cm | FST | 14080-11 | |
| Tissue forceps | FST | 11021-14 | |
| Surgical blade No. 20 | Swann-Morton LTD | 3006 | Carbon steel |
| Surgical blade handles | Swann-Morton LTD | ||
| Syringe, 1 ml | ARTSANA | Disposable | |
| Temgesic, buprenorphine | ESSEX Chemie AG | 0.3 mg/ml | |
| Tissue Culture dishes 10 cm, 60.1 cm2 | TPP | ||
| Vaseline | Vifor SA | ||
| Warm pad | Solis | Type 223 |
References
- Mahillo, B., Carmona, M., Álvarez, M., White, S., Noel, L., Matesanz, R. Global Data in Organ Donation and Transplantation. transplantation. 92 (10), 1069-1074 (2011).
- Halleck, F., et al.
- Wood, K. J., Bushell, A., Jones, N. D. Immunologic unresponsiveness to alloantigen in vivo. a role for regulatory T cells. Immunological reviews. 241 (1), 119-132 (2011).
- Sykes, M. Immune tolerance: mechanisms and application in clinical transplantation. Journal of Internal Medicine. 262 (3), 288-310 (2007).
- McFarland, H. I., Rosenberg, A. S.
- McKenzie, I. F., Morgan, G. M., Sandrin, M. S., Michaelides, M. M., Melvold, R. W., Kohn, H. I. B6.C-H-2bm12. A new H-2 mutation in the I region in the mouse. The Journal of experimental medicine. 150 (6), 1323-1338 (1979).
- McIntyre, K. R., Seidman, J. G. Nucleotide sequence of mutant I-A beta bm12 gene is evidence for genetic exchange between mouse immune response genes. Nature. 308 (5959), 551-553 (1984).
- Stuart, P. M., Beck-Maier, B., Melvold, R. W. Provocation of skin graft rejection across murine class II differences by non--bone-marrow-derived cells. Transplantation. 37 (4), 393-396 (1984).
- Hausmann, B., Palmer, E. Positive selection through a motif in the alphabeta T cell receptor. Science. 281 (5378), 835-838 (1998).
- Bill, J., Ronchese, F., Germain, R. N., Palmer, E. The contribution of mutant amino acids to alloantigenicity. The Journal of experimental medicine. 170 (3), (1989).
- Monaco, A. P. Immunosuppression and tolerance for clinical organ allografts. Current Opinion in Immunology. 1 (6), 1174-1177 (1989).
- Rosenberg, A. S., Singer, A. Cellular basis of skin allograft rejection: an in vivo model of immune-mediated tissue destruction. Annual Review of Immunology. 10, 333-358 (1992).
- Kingsley, C. I., Nadig, S. N., Wood, K. J. Transplantation tolerance: lessons from experimental rodent models. Transplant international : official journal of the European Society for Organ Transplantation. 20 (10), 828-841 (2007).
- Larsen, C. P., et al. Long-term acceptance of skin and cardiac allografts after blocking CD40 and CD28 pathways. Nature. 381 (6581), 434-438 (1996).
- Tomura, M., Nakatani, I., Murachi, M., Tai, X. G., Toyo-oka, K., Fujiwara, H. Suppression of allograft responses induced by interleukin-6, which selectively modulates interferon-gamma but not interleukin-2 production. Transplantation. 64 (5), 757-763 (1997).
- Ring, G. H., et al. Interferon-gamma is necessary for initiating the acute rejection of major histocompatibility complex class II-disparate skin allografts. Transplantation. 67 (10), 1362-1365 (1999).
- Rosenberg, A. S., Finbloom, D. S., Maniero, T. G., Vander Meide, P. H., Singer, A. Specific prolongation of MHC class II disparate skin allografts by in vivo administration of anti-IFN-gamma monoclonal antibody. Journal of immunology. 144 (12), 4648-4650 (1950).
- Goes, N., Sims, T., Urmson, J., Vincent, D., Ramassar, V., Halloran, P. F. Disturbed MHC regulation in the IFN-gamma knockout mouse. Evidence for three states of MHC expression with distinct roles for IFN-gamma. Journal of immunology. 155 (10), 4559-4566 (1995).
- Surquin, M., et al. IL-4 deficiency prevents eosinophilic rejection and uncovers a role for neutrophils in the rejection of MHC class II disparate skin grafts. Transplantation. 80 (10), 1485-1492 (2005).
- Gaylo, A. E., Laux, K. S., Batzel, E. J., Berg, M. E., Field, K. A. Delayed rejection of MHC class II-disparate skin allografts in mice treated with farnesyltransferase inhibitors. Transplant immunology. 20 (3), 163-170 (2009).
- Bose, A., Inoue, Y., Kokko, K. E., Lakkis, F. G. Cutting edge: perforin down-regulates CD4 and CD8 T cell-mediated immune responses to a transplanted organ. Journal of immunology. 170 (4), 1611-1614 (2003).
