Farelerde allojenik CD4 + T hücre Cevapları Eğitim için Kuyruk Cilt Nakli

Mathias Schmaler; Maria A. S. Broggi; Simona W. Rossi

doi:10.3791/51724

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Farelerde allojenik CD4 + T hücre Cevapları Eğitim için Kuyruk Cilt Nakli

13.2K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/51724

⸱

25 Temmuz 2014

Mathias Schmaler^*¹ , Maria A. S. Broggi^*¹ , Simona W. Rossi¹

¹Department of Biomedicine, Immunoregulation, University of Basel and University Hospital Basel

^* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

Kuyruk-deri transplantasyonu, farelerde allojenik immün yanıtlar sırasında T hücresine bağlı reddi ve tolerans indüksiyonunu incelemek için güçlü bir modeldir. Bu protokolün avantajları, minör invaziv cerrahi ve alıcı fareyi feda etmeye gerek kalmadan izleme kolaylığıdır.

Özet

Allo-antijen tanıma sırasındaki T hücresi yanıtları ve sonuçlarının incelenmesi, donör ve konakçı T hücreleri arasında ayrım yapmayı, grefti kolayca izlemeyi ve farklı immünolojik soruları yanıtlamak için sistemi uyarlamayı sağlayan bir model gerektirir. Medawar ve meslektaşları 1955'te farelerde allojenik kuyruk derisi nakli kurdular. O zamandan beri, deri nakli modeli, belirli soruları yanıtlamak için sürekli olarak değiştirildi ve uyarlandı. Kuyruk derisinin kullanılması, bu modelin greft reddi için puanlanmasını kolaylaştırır, ne kapsamlı hazırlık ne de derin anestezi gerektirir, tüm genetik geçmişe sahip hayvanlara uygulanabilir, iskemik nekrozu caydırır ve kimyasal ve biyolojik müdahaleye izin verir.

Genel olarak, hem CD4⁺ hem de CD8⁺ allojenik T hücreleri, farklı fare suşlarından eşleşmemiş majör histouyumluluk antijenlerini tanıdıkları için allogreftlerin reddedilmesinden sorumludur. Deri nakli yapılan farelerde allojenik T hücrelerini aktive etmek için çeşitli modeller tanımlanmıştır. C57BL / 6 fareleri de dahil olmak üzere farklı fare suşlarında majör histouyumluluk kompleksi (MHC) sınıf I ve II moleküllerinin tanımlanması, T hücresi aracılı alloyanıtları anlamak ve incelemek için önemli bir adımdı. Burada tarif edilen kuyruk derisi nakli modelinde, MHC sınıf II (I-A b) molekülünün antijen sunan oluğundaki üç noktalı bir mutasyon (I-A ^bm12), C57BL / 6 farelerinde güçlü allojenik CD4 + T hücresi aktivasyonunu indüklemek için yeterlidir. C57BL/6 fareler üzerindeki I-A^bm12 farelerinden alınan deri greftleri 12-15 gün içinde reddedilirken, sinjeneik greftler 100 güne kadar kabul edilir. T hücrelerinin (CD3^-/- ve Rag2^-/-fareler) yokluğu, 100 güne kadar deri grefti kabulüne izin verir, bu da 2 x 10⁴ vahşi tip veya transgenik T hücrelerinin aktarılmasıyla üstesinden gelinebilir. Evlat edinerek transfer edilen T hücreleri, I-A^bm12 nakledilen Rag2^-/- farelerde çoğalır ve IFN-γ üretir.

Giriş

Bu tür deri, kalp ve böbrekler gibi katı organ nakli artık dünya çapında tıbbi uygulamada ¹ standart bir işlemdir. Başarıyla nakledilen organlar vericinin MHC antijenleri tanıyan alıcı bağışıklık sisteminin aktivasyonu ile reddedilebilir. Bu nedenle nakledilen hasta immünosüpresif ilaçlar ² ile tedavi gerekir. Farelerde allojenik deri transplantasyonu 1955 yılında Medawar ve arkadaşları tarafından kurulan ve daha sonra MHC kompleksi (MHC) sınıf I ve II olarak tanımlanan hedeflenen moleküllerinin belirlenmesi için yararlı oldu. O zamandan beri, deri nakli modelinin sürekli değiştirilmiş ve T hücre alt rolü ve greft reddini ^2-4 bastırma....