Introduction
השתלה של איברים מוצקים כגון עור, לב וכליות היא כעת הליך סטנדרטי בפרקטיקה רפואית ברחבי העולם 1. ניתן לדחות איברים מושתלים בהצלחה על ידי הפעלה של מערכת חיסון הנמען, אשר מזהה את האנטיגנים histocompatibility העיקריים של התורם. חולים מושתלים ולכן זקוקים לטיפול בתרופות לדיכוי המערכת החיסונית 2. השתלה אלוגנאית עור בעכברים הוקמה על ידי מךוואר ועמיתיו בשנת 1955 והייתה מועיל לזיהוי המולקולות הממוקדות תיארו מאוחר יותר כמורכב histocompatibility מרכזי (MHC) אני בכיתה ו-II. מאז, מודל השתלת עור כבר שונה באופן רציף ומותאם לללמוד את התפקיד של תת תא T ואת הרלוונטיות של חומר כימי וביולוגית התערבות בדיכוי דחיית שתל 2-4. עור מהאוזן ותא המטען קשה יותר להכין ורגישים יותר לחוסר חמצן ונימק מאשר זנב עור-5; עם זאת,הליך ההשתלה הוא דומה. בנוסף הניטור של השתלות עור הזנב הוא קל בשל מרקם השיער האופייני לעור.
מאמר זה מספק נוהל מפורט לכיתת MHC II השתלת עור זנב חוסר התאמה המאפשרת לחקר היבטים שונים של דחייה מסוג CD4 + T תא בתיווך של שתל וסובלנות בעכברים. המוטציה הטבעית שלוש הנקודות בMHC הכיתה השנייה ב IA מולקולה (הנקראת IA bm12) 6-9 די בכך כדי לגרום לדחייה של allografts עור בעכברי C57BL / 6 8. מולקולת bm12 IA מפעילה CD4 + T תאים עם קולטן תא αβ-T שונים (TCR) שרשרות מעכברי C57BL / 6, ביניהם תאי T Vα2Vβ8-TCR ספציפיים זוהו על מנת ליצור עכבר TCR-מהונדס 10. העברת המאמצת של תאי T Vα2Vβ8-TCR ספציפיים נעשתה שימוש כדי לבסס מודל דחייה בC57B עם מערכת החיסון החלשL / 6 RAG2 - / - העכברים מושתלים עם עור IA bm12.
הבדלים גנטיים בין תורם למקבל להשפיע על התוצאה של קבלת השתלה ודחייה. ישנם סוגים שונים של השתלות: השתלות autografts הם מן הפרט הנמען עצמו; syngrafts וallografts הם השתלות מאנשים זהים מבחינה גנטית וגנטי שאינם קשורים בהתאמה. קבלה של השתלות איברים אלוגנאית שונות הוכח על ידי התערבות כימית וביולוגית בחולים ומודלי עכבר 11,3,4. בגישה בסיסית, עכברים שטופלו בנוגדן אנטי CD3 C57BL / 6 הראו הישרדות ממושכת של עור זנב-IA bm12 (נתונים שלא פורסמו). דלדול של CD4 + ו CD8 + T תאים לפני ההשתלה בעכברי נמען הביא לקבלה שלי בכיתה MHC והשני שתלי תואמים (חזון ב12). מעניין לציין, כי דחייה של שתלי עור תלוי בנוכחות של CD4 + ב12). במודל זה, מיקוד אינטראקציות ספציפיות בין תאי מערכת החיסון שונים על ידי חסימת מולקולות costimulatory עם נוגדנים או דיכוי עם תאי T רגולטוריים עלול לגרום סובלנות (נתונים שלא פורסמו). ואכן, החסימה גם CD40 CD28 והובילה לסובלנות של שתל עור לטווח ארוך 13,14.
השתלת עור הזנב היא קלה לביצוע וקל לניטור בהשוואה להשתלה של איברים אחרים. בנוסף, השתלות עור הזנב הן קלים להכנה והם פחות רגישים לאיסכמיה מאשר רקמות עור אחרות. בניגוד להרדמה מוזרקת, השימוש בגז הרדמה (isofluorane) במהלך השתלה מקצר גם את ההליך והתאוששות נמען זמן. קרלינג של השתלת עור הזנב, דבר שעלול להוביל לריפוי פצע שלם ודחיית שתל, נמנע על ידי יישום של דבק רקמות. יתר על כן, מודל השתלת עור זנב IA bm12 בלעדי מפעיל CD4 פרוטוקול זה מתאר מודל עכבר אמין, לשחזור ומעקב בקלות, המאפשר להתערבות כימית וביולוגית. המודל מיועד לחקירת אינדוקציה דחייה וסובלנות של השתלות עור הזנב.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
בפרסום הסרטון הזה ופרוטוקול, כל ההליכים בבעלי החיים נערכו בהתאם לפרוטוקול שאושר על ידי בעלי החיים Cantonal הרשות באזל, שוויץ. לבצע את כל ההליכים בתנאים שבם ניתן סטרילי.
1. הכנת הניתוח
- החיטוי כל מכשירי הניתוח וגזה לפני השימוש.
- מחממים את הכרית החמה ולארגן את מכשירי ניתוח על השולחן (הטבלה של חומרים / שיטות).
- פתח את תחבושות רצועת אצבע. החל וזלין על משטח הפצע עם מטלית כותנה (לוודא הגזה מכוסה לחלוטין).
- לשקול את העכברים ולנהל שיכוך כאבים עצירות 0.05 מ"ג / קילוגרם משקל גוף. שים לב: זה יספק שיכוך כאבים מייד לאחר השתלה.
2. הכנה של עור הזנב להשתלות
- להרדים עכברי תורם (למשל, bm12 IA) לCO מחנק 2 ו-Disinfect הזנבות עם פתרון חיטוי לפני הכריתה.
- מקם את הזנב עם הפס השחור על לוח פלסטיק נקי ולחתוך אותו לאורך ציר אורך הקו האמצעי, מה שהופך את החתך שטחי מעורב רק את שכבת העור.
- למשוך את העור מהזנב באמצעות מלקחיים מרתקים.
- שים את עור הזנב בצלחת תרבית תאי 10 סנטימטר מלא ב10 מיליליטר HBSS.
3. הליך כירורגי
- הרדימי עכברי נמען (לדוגמא, C57BL / 6) על ידי שאיפה של פתרון isofluorane 3% בקופסא אינדוקציה שקופה. הערה: זה לוקח 3-5 דקות לעכבר כדי להגיע להרדמת מטוס כירורגית. השתמש במשחת וטרינר על עיניים כדי למנוע יובש ואילו בהרדמה.
- העבר את העכבר על משטח החם ולהחיל isofluorane 1.5% באמצעות מסיכת פה ותחת של כל רפלקס בבעלי חיים על ידי בוהן צביטה.
- לגלח את אתר הגב של עכברי הנמען (לדוגמא, C57BL / 6) ולהסיר שערות מזהמים באמצעות SW גזה יבשAB.
- לחטא אתר השתלה מגולח עם פתרון מזוהם.
- לצבוט את העור עם מלקחיים באתר המרכז / ימין של dorsum ולהשתמש במספריים מעוגלים לעשות חתך עגול של כ 1 x 0.6 סנטימטר.
- אם דימום מתרחש, ולאחר מכן לנקות את הפצע עם מקלון צמר גפן סטרילי.
- להעריך את גודל החתך ולחתוך השתלה של הגודל המוערך מעור הזנב באמצעות האזמל.
- לקצץ פינות לעגל את ההשתלה.
- טען את ההשתלה באזמל, העודף יבש של HBSS על מקלון צמר גפן סטרילי ולמקם אותו במיטת השתל של עכבר הנמען.
- הימנע מחופף של תורם ועור מארח ולהחיל דבק רקמות באזור המגע באופן בלעדי.
- החל טיח ללא קמטים סביב המותניים העכבר.
- החל תחבושת לא אלסטי דבק כדי לתקן את הטיח לעכבר (3 מ"מ עבר).
- לחתוך עם המספריים על 3 מ"מ באתר הגחון העליון של התחבושת. הערה: זה הוא להימנע TRapping שיניו של העכבר בשלב ההתאוששות.
- הסר את ההרדמה הפה המסכה ולשמור על העכברים המושתלים על כרית החימום עד ערה.
- לחזור עכברים מושתלים לכלובים שלהם רק כאשר התאוששו באופן מלא ולהעריך את הניידות שלהם כדי להבטיח שהתחבושת לא הדוקה מדי.
- לעקר את כל מכשירי הניתוח עם אתנול 70% לפני שתמשיך בניתוח הבא.
4. טיפול שלאחר הניתוח
- הוספת סירופ המכיל אקמול למי השתייה (4 מ"ג / מיליליטר) ולנהל אותו למשך 7 ימים.
- חזור עכבר לחדר בעלי החיים ברגע שהיא התאוששה.
- לעקוב מקרוב אחר עכברים לסימנים קליניים כוללים דיכאון או שינויים אחרים התנהגותיים (אכילה או חוסר תנועה), מראה נורמלי (חוסר הטיפוח) או תנוחה (pilo-זקפה או יציבה כפופה) בפעם התחבושת היא במקום (שבוע 1).
5. הסרת תחבושת (6-7 ימים לאחר השתלה)
- Anesthetize עכברים על ידי שאיפה של פתרון isofluorane 3% בקופסא שקופה אינדוקציה (ראה לעיל).
- לחתוך תחבושת וגבס עם מספריים עורק ובזהירות להסיר אותם. הערה: למנוע מתיחה של אתר ההשתלה.
- לפקח על העכברים המושתלים לסימנים קליניים (ראה 4.3) ואת הציון לדחייה של שתלי עור (טבלת 1). הערה: מערכת ציון השתל מנצלת את מרקמי שיער השונים על עור הזנב בהשוואה לעור הגב. המראה של ההשתלה והדחייה שלה הוא מסווג ב3 כיתות. שתלי עור אלוגנאית (MHC II תואם, למשל, IA bm12) של C57BL / 6 עכברים עם מערכת חיסון תקין בדרך כלל נדחים בתוך 12-15 ימים לאחר השתלה (הנתונים שלו ו15-20).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
בגישה ראשונה C57BL / 6 עכברים הושתלו עם allografts bm12 IA וsyngrafts ב IA. לאחר הסרת תחבושת, שתל סימנים גלויים של ריפוי פצע בלי סגירה של הקשר באזור C57BL / 6 עכברים (איור 1 א). לאחר הסרת תחבושת, דלקת בתיווך תאי CD4 + T הובילה להופעתו של אזורי נמקים (כתמים אדומים) והדחייה של allografts bm12 IA בעכברי C57BL / 6 בתוך 13 ימים לאחר ההשתלה (איור 1 ב-C, סמלים מלאים), בעוד syngrafts היו נסבל עד 100 ימים (איור 1 ב-C, סמלים פתוחים). נתונים אלו מראים את ההתקדמות של דחייה חריפה של שתלי bm12 IA בC57BL / 6 עכברים עם מערכת חיסון.
מחקרים שונים מראים כי דחייה של עור זנב תואם MHC הכיתה השני תלויה בנוכחותם של תאים מסוג CD4 + T אלוגנאית (חזון ב12). ואכן, CD3ε הלקוי תא T - / - </ Sup> עכברים ו-T-ו-B-תאי RAG2 הלקוי - / - עכברים הראו ריפוי פצע מלא ונסבלים bm12 IA תל עד 100 ימים (איור 2), ואילו עכברי C57BL / 6 דחו שתלים בתוך 13 ימים (איור 2) . הקבלה של עור זנב תואם IA bm12 מאפשרת למחקר של תאים אלוגנאית CD4 + T ופונקציות מפעיל שלהם במודל של עכברים ללא פתולוגיות מחלה קשות.
כדי לשבור את הסובלנות הוקמה בCD3ε - / - וRAG2 - / - עכברים, תאים מסוג CD4 + T הועברו adoptively: 2 x 10 C57BL / 6 תאים מסוג CD4 + T 4 polyclonal היו מספיקים כדי לגרום לדחייה של שתלי bm12 IA בתוך 14 ימים ( מידע לא מוצג). העברה של 50,000 ו -100,000 C57BL / 6 תאים מסוג CD4 + T לא להאיץ את תהליך דחיית השתל בCD3ε - / - וRAG2 - / - עכברים. נתונים אלה מדגישים את תפקידו של allogenתאי EIC CD4 + T במודל דחיית שתל עור החריף.
היתרון של מודל השתלת עור הזנב הזה הוא שניתוח תפקודי של תאים מסוג CD4 + T יכול להיעשות בקלות על ידי העברת מאמצת של תאים מסוג CD4 + T אנטיגן הספציפי. עכבר ABM המהונדס 9 נחשב לכלי אידיאלי כדי להתוות את ההפעלה וההתנהגות פנוטיפי של האוכלוסייה ללא ההשפעה של תאים מסוג CD4 + T שאינם ספציפיים. ההעברה של 2 x 10 4 תאי ABM אנטיגן הספציפי הייתה מספיק כדי לגרום לדחייה של שתלי bm12 IA בRAG2 - / - עכברים בתוך 13 ימים (3A-B איור). בנוסף, תאי ABM קלים לבודד וניתן לעקוב באמצעות הביטוי של רשתות Vα2Vβ8-TCR (איור 3 ג). התפשטות ABM תא וייצור של ציטוקינים בbm12 IA מושתל RAG2 - / - עכברים נחקרו. תאים התרבו ABM extensively כפי שנקבע על ידי assay eFluor670 דילול (איור 3D) ועד 30% מתאי ABM מיוצרים IFN-γ על PMA-גירוי (איור 3E).
יחדיו, נתונים אלה מראים כי מספר קטן יחסית של תאים מסוג CD4 + T אלוגנאית נדרשים כדי לגרום לדחייה של שתלי עור IA bm12, טיוח אידיאלי מודל זה לניתוח של תאי T אלוגנאית עם פתולוגיה חמורה מינימאלית.
איור 1. השתלה של עכברים עם אלוגנאית ועור זנב syngeneic. () C57BL / 6 עכברים הושתלו עם אלוגנאית (IA bm12) וsyngeneic (IA ב) עור זנב (n = 5 לכל קבוצה). תמונות ממחישות allografts (משמאל) וsyngrafts (מימין) לאחר הסרת תחבושת ביום 7. (ב) ניקוד ו( C)הישרדותו של עור שתל מיום 7 עד היום של דחייה או ניטור סופי (יום 100). אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
. איור 2 allografts נסבלים בהיעדר תאי T בעכברי ההישרדות של RAG2 -. / - בשתלי עור מושתלים בעכבר C57BL / 6, CD3ε - - IA bm12 / - וRAG2 - / - עכברים (n = 4-6 לכל קבוצה) ואיור של שתלים נדחו והתקבלו. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
. איור 3 Anti-IA bm12 תאים מסוג CD4 + T ספציפיות להתרבות ולייצר IFN-γ במהלך דחיית שתל () ניקוד והישרדות (B) של שתלי IA bm12 עור הזנב בRAG2 -. / - עכברים (n = 5) adoptively הועבר עם 2 x 10 4 תאי ABM אנטיגן ספציפי. (C) Vα2Vβ8-צביעת תאי ABM מבודד מבלוטות הלימפה של עכברים הטרנסגניים ABM. (ד ') דילול eFluor670 של תאים מתרבים ABM וייצור (E) IFN-γ של PMA- גירוי תאי ABM מבודד מבלוטות הלימפה של RAG2 עור מושתל IA bm12 - / -. עכברים ביום 9 לאחר העברת מאמצת ABM תא (n = 5 עכברים) נא ללחוץ כאןלהציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.
| ציון שתל | תיאור |
| 3 + | אין אזורים ונוכחות של פס שחור מבריק אדומים |
| 2 + | מראה של קטן אזורים אדומים, אובדן פס שחור מבריק ויובש |
| 1 + | מראה של אזורים אדומים גדולים, לא פס והצטמקות שחורים |
| 0 | דחיית שתל מוגדרת כנימק 80% |
מערכת ציון שתל הטבלה 1.. המראה של ההשתלה ודחייתה הוא בהסעדהgorized ב3 כיתות, מנצל את מרקמי שיער השונים על עור גב זנב ו.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
השתלת עור היא שיטה בשימוש נרחבת ללימוד דחייה וסובלנות תלויה בתאי T. מאז מודל השתלת העור הוקם, כמה התאמות ושינויים כבר מיושמים. בהליך המתואר, השתלת עור זנב IA bm12 מתבצעת באמצעות גז הרדמה (isofluorane). השימוש בגז ההרדמה מקטין את הזמן של ביצוע והתאוששות עכברים, אשר מפחית את הלחץ על עכברים מושתלים. ההליך מעסיק דבק רקמות כדי לתקן את עור הזנב, הנוטה להתכרבל יותר מאוזן או רקמת עור גב. יתר על כן, חשוב לשטח את עור הזנב לפני חיתוך וחיתוך הקצוות כמו זה מפחית מסתלסל ומשפר את המיצוב של עור הזנב באתר הכריתה הגבי.
כדי להעריך את דחיית שתל או קבלתו נדרשה להכין את עור הזנב עם הפס השחור (למשל, בעכברי C57BL / 6) באמצע של השתל כדי להקל על ניקוד של טרהnsplants מבוסס על הבדלי מרקם שיער.
המוטציה של מולקולת MHC bm12 Class II IA בלעדית מפעילה CD4 + T תאי מערכת חיסון ובעכברים עם מערכת חיסון חלש (של אותו רקע גנטי). מצד אחד זה מקל על הפרשנות של התוצאות, אבל מצד השני זה מגביל את השיטה ללימודי CD4 + T תאים. כדי להאריך את הפעלת תא T לקבוצות משנה אחרות תא T, זנב עור מתורמים אחרים, לדוגמא, אותו רקע גנטי כוללים עכברי bm1 IA ורקע גנטי שונה, כולל BALB / ג או DBA יכולים להיות מושתלים בעכברים.
במחקרי דחייה חריפים, אנחנו נהנים מהמוטציה באופן הטבעי בחריץ הכיתה השני MHC וההפעלה של תאים מסוג CD4 + T אלוגנאית ללמוד דחיית איברים בעכברים. C57BL / 6 עכברים דחו תלי עור IA bm12 בתוך 14 ימים לאחר השתלה, אשר עולה בקנה אחד עם רוב המחקרים USIעור ng IA bm12 השתלות 15-20. בנוסף מודל הדחייה החריף הוא בשימוש נרחב כדי לבדוק את הפוטנציאל אלוגנאית של תאים מסוג CD4 + T מעכברי גן לקוי. ואכן, IFN-γ - / - עכברים הראו עכבו דחיית IA bm12 שתל עור (נתונים שלא פורסם ו16). חסימת γ IFN ידי ממשל של חסימת דחיית נוגדנים עכבו באופן דומה 15,17,18. הדבר זה מצביע על תפקיד מרכזי של IFN-γ בייזום MHC הכיתה השני ביטוי בAg-הצגה ותאי אנדותל (חזון ב12). מאז עכברי perforin לקוי לא לעכב את דחיית שתל עור IA bm12 21, נראה את התפקיד של ציטוקינים להיות חשוב יותר לדחייה. ואכן, IL-6 ממשל הביא להישרדות שתל ממושכת, ככל הנראה על ידי downregulating IFN-γ-ייצור 15. בנוסף, נויטרופילים נראים לשחק תפקיד מרכזי בדחייה של שתלי עור IA bm12 בעכברי IL-4-לקויים 19 bm12 בעכברי 20. מנהל מדחייה אנטי CD3 עיכובי נוגדן IA bm12 שתל עור בעכברים עם מערכת חיסון (נתונים שלא פורסמו). יתר על כן, הראה שCD3ε תא T הלקוי - / - וRAG2 - / - עכברים קיבלו שתלי עור אלוגנאית עד 100 ימים. סובלנות בעכברים אלו ניתן לבטל בקלות / נשברה על ידי העברת מאמצת של תאים מסוג CD4 + T מC57BL / 6 עכברים עם מערכת חיסון. העברה של 2 x 10 4 תאים מסוג CD4 + T או תאי ABM אנטיגן הספציפי מספיקים כדי לגרום לדחיית שתל IA bm12 סביב היום 14. תאי ABM Vα2Vβ8 החיוביים מבודדים הראו התפשטות נרחבת וייצור IFN-γ בבלוטות הלימפה לפני הדחייה, אולם הדחייה הייתה תלויה מפורש I-Abm12יון בהשתלת העור.
לסיכום, מודל העכבר הזה הוא דרך מצוינת ללמוד הפעלת מספרי תא T הנמוך במהלך דחייה או סובלנות. השתלת עור הזנב היא קלה לביצוע ויכולה להיות מיושמת על עכברים עם רקע גנטי שונה כדי ללמוד את התגובות אלוגנאית של תאי T ללא גביית השפעה פיזיולוגית חמורה. יתר על כן, מודל זה הוא אידיאלי להתערבויות עם חומרים כימיים וביולוגיים שיגרמו או לשבור את סובלנות השתלת עור.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Betadine standard solution | Mundipharma | ||
| Cotton swab | Carl Roth GmbH | 31025060 | |
| Dafalgan , UPSA | Bristol Myers Squibb UPSA | ||
| Hansaplast finger strips | Beierdorf AG | REF.76861 | |
| Histoacryl tissue adhesive | Braun | REF.1050052 | |
| Leukotape classic , 2 cm x 10 m | BSN Medical SAS | REF.02204-00 | |
| PBS, Phosphate Buffered Saline, pH 7.4 | Invitrogen | 10010015 | GIBCO |
| Sterile gauze, 5 x 5 cm, 8 ply | MaiMed GmbH | 21010 | |
| Narrow pattern forceps | FST | 11003-12 | |
| Fine iris scissor curved | FST | 14095-11 | |
| Fine iris scissor | FST | 14094-11 | |
| Mayo scissors | FST | 14010-15 | |
| Artery scissors ball tip 11.5 cm | FST | 14080-11 | |
| Tissue forceps | FST | 11021-14 | |
| Surgical blade No. 20 | Swann-Morton LTD | 3006 | Carbon steel |
| Surgical blade handles | Swann-Morton LTD | ||
| Syringe, 1 ml | ARTSANA | Disposable | |
| Temgesic, buprenorphine | ESSEX Chemie AG | 0.3 mg/ml | |
| Tissue Culture dishes 10 cm, 60.1 cm2 | TPP | ||
| Vaseline | Vifor SA | ||
| Warm pad | Solis | Type 223 |
References
- Mahillo, B., Carmona, M., Álvarez, M., White, S., Noel, L., Matesanz, R. Global Data in Organ Donation and Transplantation. transplantation. 92 (10), 1069-1074 (2011).
- Halleck, F., et al.
- Wood, K. J., Bushell, A., Jones, N. D. Immunologic unresponsiveness to alloantigen in vivo. a role for regulatory T cells. Immunological reviews. 241 (1), 119-132 (2011).
- Sykes, M. Immune tolerance: mechanisms and application in clinical transplantation. Journal of Internal Medicine. 262 (3), 288-310 (2007).
- McFarland, H. I., Rosenberg, A. S.
- McKenzie, I. F., Morgan, G. M., Sandrin, M. S., Michaelides, M. M., Melvold, R. W., Kohn, H. I. B6.C-H-2bm12. A new H-2 mutation in the I region in the mouse. The Journal of experimental medicine. 150 (6), 1323-1338 (1979).
- McIntyre, K. R., Seidman, J. G. Nucleotide sequence of mutant I-A beta bm12 gene is evidence for genetic exchange between mouse immune response genes. Nature. 308 (5959), 551-553 (1984).
- Stuart, P. M., Beck-Maier, B., Melvold, R. W. Provocation of skin graft rejection across murine class II differences by non--bone-marrow-derived cells. Transplantation. 37 (4), 393-396 (1984).
- Hausmann, B., Palmer, E. Positive selection through a motif in the alphabeta T cell receptor. Science. 281 (5378), 835-838 (1998).
- Bill, J., Ronchese, F., Germain, R. N., Palmer, E. The contribution of mutant amino acids to alloantigenicity. The Journal of experimental medicine. 170 (3), (1989).
- Monaco, A. P. Immunosuppression and tolerance for clinical organ allografts. Current Opinion in Immunology. 1 (6), 1174-1177 (1989).
- Rosenberg, A. S., Singer, A. Cellular basis of skin allograft rejection: an in vivo model of immune-mediated tissue destruction. Annual Review of Immunology. 10, 333-358 (1992).
- Kingsley, C. I., Nadig, S. N., Wood, K. J. Transplantation tolerance: lessons from experimental rodent models. Transplant international : official journal of the European Society for Organ Transplantation. 20 (10), 828-841 (2007).
- Larsen, C. P., et al. Long-term acceptance of skin and cardiac allografts after blocking CD40 and CD28 pathways. Nature. 381 (6581), 434-438 (1996).
- Tomura, M., Nakatani, I., Murachi, M., Tai, X. G., Toyo-oka, K., Fujiwara, H. Suppression of allograft responses induced by interleukin-6, which selectively modulates interferon-gamma but not interleukin-2 production. Transplantation. 64 (5), 757-763 (1997).
- Ring, G. H., et al. Interferon-gamma is necessary for initiating the acute rejection of major histocompatibility complex class II-disparate skin allografts. Transplantation. 67 (10), 1362-1365 (1999).
- Rosenberg, A. S., Finbloom, D. S., Maniero, T. G., Vander Meide, P. H., Singer, A. Specific prolongation of MHC class II disparate skin allografts by in vivo administration of anti-IFN-gamma monoclonal antibody. Journal of immunology. 144 (12), 4648-4650 (1950).
- Goes, N., Sims, T., Urmson, J., Vincent, D., Ramassar, V., Halloran, P. F. Disturbed MHC regulation in the IFN-gamma knockout mouse. Evidence for three states of MHC expression with distinct roles for IFN-gamma. Journal of immunology. 155 (10), 4559-4566 (1995).
- Surquin, M., et al. IL-4 deficiency prevents eosinophilic rejection and uncovers a role for neutrophils in the rejection of MHC class II disparate skin grafts. Transplantation. 80 (10), 1485-1492 (2005).
- Gaylo, A. E., Laux, K. S., Batzel, E. J., Berg, M. E., Field, K. A. Delayed rejection of MHC class II-disparate skin allografts in mice treated with farnesyltransferase inhibitors. Transplant immunology. 20 (3), 163-170 (2009).
- Bose, A., Inoue, Y., Kokko, K. E., Lakkis, F. G. Cutting edge: perforin down-regulates CD4 and CD8 T cell-mediated immune responses to a transplanted organ. Journal of immunology. 170 (4), 1611-1614 (2003).
