Biz hangi tarafından farmakolojik reaktifler bütün hücreli yama-kelepçe kayıt sırasında yönetilemez duruma gelir ve başarısı için çok önemli özellikleri çeşitli yönlerini vurgulamak puf tekniğini tanımlamak.
Farmakolojik yönetim yaygın olarak bütün hücreli yama-kelepçe beyin dilimler halinde kayıt yürütmek için kullanılır. Elektrofizyolojik kayıt sırasında uyuşturucu uygulamasının en iyi yöntemlerden birini farmakolojik reaktifler beyin dilimleri nöronal faaliyetleri üzerindeki etkisini incelemek için kullanılan puf tekniğidir. Puff uygulama en büyük avantajı ilaç konsantrasyonu kayıt site çevresinde hızlı, böylece membran reseptörleri duyarsızlaştırma engelleyen artırır olmasıdır. Puff uygulama başarılı kullanımı dikkat için aşağıdaki öğeleri içerir: ilaç konsantrasyonu, puf micropipette, puf micropipette ve kaydedilen nöron ucu ve süresi arasındaki mesafe parametreleri ve puf sürüş basınç (inç kare başına pounds PSI). Bu makalede gama – aminobütirikasit (GABA) bir nöron prefrontal kortikal dilimin üzerine şişirme tarafından indüklenen bütün hücreli akımları kaydetmek için adım adım bir yordam açıklanır. Özellikle, aynı yordamı küçük değişiklikler oluşur ve striatum gibi diğer beyin bölgeleri ve hücre kültürleri gibi farklı ürünleri ile uygulanabilir.
Yama-klemp tekniği, nöronlar, elektrik sinyalleri soruşturma için birincil araç 1970’lerde1,2geliştirilmiştir. O nasıl spesifik tedaviler üzerinde bilgi sağlamak bu tekniği önemli bir avantajı olduğunu (örneğin, farmakolojik) nöronal işlevleri veya gerçek zamanlı3kanalları değiştirebilir. Nöronal fonksiyon farmakolojik değerlendirme bütün hücreli bir beyin dilimi kayıt sırasında kaydedilen nöronlar agonistler veya belirli reseptörlerinin antagonistleri gibi ilaçlar uygulamaya gerektirir. Bu yöntem uygulama böylece daha iyi nöronlar4fizyolojik ve patolojik özelliklerini anlamak için önde gelen özel bir ilaç takip meydana gelen nöronal değişiklikler tanımlamasını sağlar. Farmakolojik yönetim ya da perfüzyon5 veya puf6yapılabilir rağmen ikinci üstün bir tekniktir. Özellikle: (i) uygulama hızla puf artar ilaç konsantrasyonu bir seviyeye kaydedilen nöron etrafında öyle ki membran reseptörleri duyarsızlaştırma engellenir; (II) böylece bu nedenle yönetilen kimyasallar beyin dilimleri üzerinde herhangi bir istenmeyen etkileri azaltır banyo çözüm üzerinde küçük etkisi şişirilmiş uyuşturucu hacmi son derece düşüktür; (iii) puf Protokolü olabilir ayarlamak ve kaydedilmiş, deneme çok hassas tekrarlanabilir; yapma (iv) puf uygulama agonistler/antagonistleri, özellikle bu tür reaktifler pahalı veya elde etmek zor olduğu ekonomik kullanımını gösterir.
Burada, Bütün hücreli akımları GABA akut hazırlanan beyin dilimleri, nispeten iyi korunmuş beyin devreleri avantajına sahip bir hazırlık şişirme tarafından indüklenen kayıt üzerinde durulacak. Bu makalede nasıl inhibitör akımları puf kaynaklı7 kuralları açıklanacaktır. Sezyum (Cs+) kullanarak-tabanlı iç çözümler ve nöronlar 0 tutan mV, GABA-puf uyarılmış tanıtacak inhibitör postsinaptik akımları (eIPSCs) uygun teknik ayrıntılarla. Biz gösteriyor ki eIPSC lipopolysaccharide (LPS) enjeksiyon8tarafından indüklenen depresyon bir fare modeli kullanarak GABA puff tarafından uyarılmış genlik, LPS-Injected fareler araç kontrollere göre dilim içinde önemli ölçüde azalır. Bu makalede nasıl nefes tekniği yaygın olarak uygulanabilir herhangi bir kimyasal madde, bileşikleri veya uyuşturucu beyin dilimleri nöronal faaliyetleri üzerindeki etkisini değerlendirmek yönelik çalışmalar için göstermelidir bizim niyeti olduğunu.
Puf uygulama postsinaptik reseptör işlevi3,4,7değerlendirmek için yaygın olarak kullanılır, ancak her deney da hassas doğrulukta denetim gerektirir. Biz burada GABA-puf prefrontal kortikal beyin dilimler halinde IPSCs (yani eIPSCs) indüklenen gösteren bütün hücreli yama sıkma, içeren bir açıklayınız. Kayıt elektrot dayanıklılığını yaklaşık 5 MΩ, puf MİKROPİPETLER uç çapı hakkında ise 2-5 µm. P…
The authors have nothing to disclose.
Yazarlar aşağıdaki kuruluşlar teşekkür etmek istiyorum: Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı Çin (31171018, 31171355), bilim ve teknoloji bölümü, Guangdong (2013KJCX0054), Guangdong Eyaleti, Doğa Bilimleri Vakfı ( 2014A030313418, 2014A030313440) ve Guangzhou bilim ve teknoloji Bürosu (201607010320).
Glass Borosilicate micropipettes | Shutter Instruments | BF150-86-10 | 1.50 mm outer diameter; 0.86 mm inner diameter |
Micropipette Puller | Shutter Instruments | MODEL P-97 | Flaming/Brow Micropipette Puller |
Micromanipulators | Shutter Instruments | MP-285 | |
Computer controlled Amplifier | Molecular Devices | Multiclamp 700B | |
Digital Acquisition system | Molecular Devices | Digidata 1440A | |
Imaging Camera | Nikon | 2115001 | Inspection equipment |
Microscopy | Nikon | Eclipse FN1 | |
Master 8 | A.M.P.I. | Master-8 Pulse stimulator | |
Vibratome Slicer | Leica | VT 1000S | |
Picospritzer Ⅲ | Parker Hannifin | Pressure Systems for Ejection of Picoliter Volumes in Cell Research |
|
Razor blade | Gillette | 74-S | FLYING EAGLE |
Video monitor | Panasonic | WV-BM 1410 | |
502 Glue | Deli | 7146 | Cyanoacrylate Glue |
Peristaltic pump | Shanghai JIA PENG Corporation | BT100-1F | |
Video Camera | Olympus America Medical | OLY-150 | |
Transfer Pipets | Biologix | 30-0138A1 |