线虫同步：获得处于相同发育阶段的蠕虫种群的方法

-首先将自肥蠕虫置于细菌食物来源播种的盘子的最后幼虫阶段。让幼虫发育成成熟的成年人，直到蠕虫体内有大量的卵子并放在盘子里。用缓冲器清洗盘子以收集鸡蛋和蠕虫。

接下来，用漂白剂溶解成人蠕虫的漂白剂代替缓冲器。在蛋壳的保护下，胚胎将存活下来，尽管它们将处于不同的发育阶段。然后用缓冲器代替漂白剂，让胚胎发育。由于幼虫在没有食物的情况下从蛋壳孵化，发育将在第一个幼虫阶段暂停。

将幼虫转移到带食物的盘子中，以恢复发育。这将刺激通过剩余幼虫阶段同步进展。

当蠕虫到达最后的幼虫阶段时，将它们移到带有食物和FUdR的盘子中，这是一种DNA合成抑制剂，可以防止后代的产生。在FUdR的存在下继续发展，产生大量无菌的成人蠕虫。在这个实验中，我们将同步线虫的种群。

-首先，将所需遗传背景的L4幼虫转移到线虫生长介质或NGM板上新播种的大肠杆菌草坪上。每个菌株至少使用两个 100 毫米或三个 60 毫米板。

在适当的生长温度下孵育蠕虫三到四天，或直到板与大量的鸡蛋和草虫集中。使用每 100 毫米线虫板约 6 毫米 M9 缓冲器洗掉盘子中的鸡蛋和蠕虫。使用玻璃巴斯德移液器，将鸡蛋和蠕虫转移到每个菌株的单独15毫升离心管中。将这些管子旋转三分钟，达到 6，180 克。

离心后，吸气出M9缓冲器，只保留动物和蛋丸。在每个管子上加入三到四毫升的漂白液，间歇性漩涡6分钟。

然后添加 M9 缓冲器以填充每个管子，并在 6，180 g 旋转一分钟。吸气超自然，用 M9 重复此洗涤三次。

洗涤后，将蛋丸移到含有约 9 毫升 M9 缓冲器的新鲜 15 毫升管中。通过在20摄氏度下螺母16至48小时同步新孵化的蠕虫。

将这些管子以 6，180 克的速度旋转 1.5 分钟后，将同步的 L1 动物放在单独的 NGM 板上新播种的 OP50 草坪上。将板块保持在20摄氏度，直到动物在大约42小时后到达L4幼虫阶段。此时，使用铂金采摘将 L4 幼虫移到 OP50 种子 NGM 板中，其中含有每毫升 FUDR 的 0.5 毫克，以防止它们产生后代。