Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- على شريحة مجهر مشحونة بشكل إيجابي، التزم بزلتي غطاء مع مسافة كافية بينهما لخلق مساحة لأدمغة دروسوفيلا ليتم تركيبها.
إزالة المتوسطة المتصاعدة الزائدة للسماح لتحديد المواقع الدقيقة للأدمغة على الشريحة في نمط الشبكة مع فصوص هوائية تواجه ما يصل، ثم جسر زلات الغطاء اثنين عن طريق التمسك زلة غطاء ثالث عبر لتغطية العقول.
لملء التجويف، ضع متوسطة تصاعد قطرة واحدة في وقت واحد في حافة التجويف، والسماح لها بالانتشار عن طريق الحركة الشعرية بحيث لا يزعج العقول.
ختم تجويف مع طلاء الأظافر، وتخزينها في السلبية 20 درجة مئوية في الظلام للحفاظ على مضان الأنسجة الملطخة.
في بروتوكول المثال، سوف نقوم بتركيب أدمغة دروسوفيلا للتصوير البؤري للخلايا العصبية الملطخة بالمناعة.
- لتركيب الأدمغة، وبناء شريحة جسر. موقف اثنين من يغطي قاعدة زلات ما يقرب من سنتيمتر واحد بعيدا على شريحة مشحونة إيجابيا. تأكد من أن الجانب المشحون إيجابيا هو الوجه.
بعد ذلك ، ضع الشريحة تحت مجهر ستيريو وأدمغة ماصة في المتوسط في المسافة بين زلات الغطاء. تأكد من ضبط الإضاءة لتحسين تصور الأدمغة.
بعد ذلك ، يستنشق الوسائط المتصاعدة الإضافية من الشريحة ، مع الحرص على تجنب الأدمغة.
ثم ضع زلة غطاء فوق الأدمغة، واستخدم طلاء الأظافر لختم حواف زلة الغطاء العلوي المرفقة بزلات الغطاء الأساسي.
الآن، تحميل تجويف المركز مع وسائل الإعلام تصاعد جديدة قطرة الحكمة، مما يسمح للوسائط ليتم رسمها تحت زلة الغطاء عن طريق العمل الشعرية.
