肌肉内注射（IM）：复合分娩到成年斑马鱼的躯干肌肉

-将三卡因麻醉鱼转移到湿海绵上，背侧朝上。将携带鱼的海绵放在显微镜下。将微注射针从身体轴向背部肌肉附近的 45度角放置。

接下来，在背鳍前面找到没有鳞片的地方，在那里你可以插入针头而不施加很大的力量。然后轻轻地插入针头，慢慢地将兴趣化合物以及酚红色等标记物注入肌肉。

如果兴趣化合物含有遗传物质，则通过在注射部位的两侧放置电极并管理电流来电击细胞。电流使肌肉细胞渗透，并能够有效地吸收遗传物质。 手术后，立即将鱼转移到回收罐中。 在下列协议中，我们将对成年斑马鱼进行肌肉注射，以提供针对分枝杆菌病的DNA疫苗。

为了在注射过程中保持鱼的固定位置，使用一块海绵，中间切一个凹槽作为衬垫。将海绵彻底浸泡在系统水中，放在培养皿中。 使用塑料勺子，将麻醉斑马鱼转移到湿海绵上，鱼的腹侧向下放在凹槽中。在显微镜下，将针头置于靠近斑马鱼背肌的45度角。然后在背鳍前找到没有鳞片的小点，将针头推入肌肉。

如果感觉到任何阻力，试试相邻的部位。使用足部开关将质粒溶液逐渐注入肌肉。在显微镜下，苯酚红色在进入肌肉组织时应可见。

注射后立即将钳子型电极放置在注射部位的每一侧，使鱼电击。按下电击器上的启动按钮，并给它六个 40伏 50 毫秒的脉冲。 然后轻轻地将鱼转移到回收罐中。 最后，根据文本协议对鱼进行麻醉后，使用紫外线在注射部位附近查看EGFP表达。