Nematode-synkronisering: En metode til at opnå populationer af orme i identiske udviklingsstadier
Published: April 30, 2023
Abstract
Kilde: Sarasija, S. og Norman, KR Måling af iltforbrug satser i intakt Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2019).
I denne video viser vi en metode til at producere en udviklingssynkront synkroniseret befolkning af sterile voksne C. elegans. Eksempelprotokollen synkroniserer orme for at studere iltforbrugshastigheder hos levende dyr.
Protocol
Denne protokol er et uddrag fra Sarasija og Norman, Måling af iltforbrug satser i intakt Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2019). 1. Vækst og synkronisering af nematodebestanden Disse dyr vil nå L4 larvestadiet efter ~ 42 timer. På dette tidspunkt skal du flytte L4 larverne ved hjælp af en platin pick til OP50 seedede NGM plader, der indeholder 0,5 mg / mL 5-fluoro-2′-deoxyuridin (FUdR) for at forhindre dem i at producere …
Representative Results
Tabel 1: Opskrifter på NGM-plader, M9-buffer og blegemiddelopløsning. M9-buffer (1 L) dH2O 1.000 mL Nacl 5 g KH2PO4 3 g Na2HPO4 <t…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 100 mm; 60 mm Petri dishes | Kord-Valmark Labware Products | 2900; 2901 | |
| 15 mL conical tubes | Corning | 430791 | |
| 50 mL conical tubes | Corning | 430829 | |
| Agar | Fisher Scientific | BP1423-2 | |
| Bacto peptone | BD; Bacto | 211677 | |
| Bacto tryptone | BD; Bacto | 211705 | |
| Bacto yeast extract | BD; Bacto | 212705 | |
| Bleach | Generic | ||
| Calcium chloride dihydrate (CaCl2·2H2O) | Fisher Scientific | C79-500 | |
| Cholesterol | Fisher Scientific | C314-500 | |
| Deionized water (dH2O) | |||
| Glass Pasteur pipettes | Krackeler Scientific | 6-72050-900 | |
| Magnesium sulfate heptahydrate (MgSO4·7H2O) | Fisher Scientific | BP213-1 | |
| Potassium phosphate dibasic (K2HPO4) | Fisher Scientific | BP363-1 | |
| Potassium phosphate monobasic (KH2PO4) | Fisher Scientific | P285-500 | |
| Sodium chloride | Fisher Scientific | BP358-10 | |
| Sodium hydroxide (NaOH) | Fisher Scientific | BP359-500 | |
| Sodium phosphate dibasic anhydrous (Na2HPO4) | Fisher Scientific | BP332-1 |
Cite This Article
Nematode Synchronization: A Method to Obtain Populations of Worms in Identical Stages of Development. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20045, doi: (2023).