Sincronizzazione nematode: un metodo per ottenere popolazioni di vermi in fasi di sviluppo identiche
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Sarasija, S. e Norman, K. R. Misurazione dei tassi di consumo di ossigeno in Caenorhabditis elegans intatti. J. Vis. Exp. (2019).
In questo video, mostriamo un metodo per produrre una popolazione sincronizzata per lo sviluppo di C. elegansadulti sterili . Il protocollo di esempio sincronizza i worm per studiare i tassi di consumo di ossigeno negli animali vivi.
Protocol
Questo protocollo è un estratto da Sarasija e Norman, Misurazione dei tassi di consumo di ossigeno in Intact Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2019). 1. Crescita e sincronizzazione della popolazione di nematodi Questi animali raggiungeranno lo stadio larvale L4 dopo ~ 42 h. In questo momento, spostare le larve L4 usando un piccone di platino su piastre NGM sementi OP50 contenenti 0,5 mg/mL 5-fluoro-2′-deossiuridina (FUdR) per …
Representative Results
Tabella 1: Ricette per piatti NGM, tampone M9 e soluzione di candeggina. M9 buffer (1 L) DH2O 1.000 mL NaCl 5 g KH2PO4 3 g Na2HPO4 <…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 100 mm; 60 mm Petri dishes | Kord-Valmark Labware Products | 2900; 2901 | |
| 15 mL conical tubes | Corning | 430791 | |
| 50 mL conical tubes | Corning | 430829 | |
| Agar | Fisher Scientific | BP1423-2 | |
| Bacto peptone | BD; Bacto | 211677 | |
| Bacto tryptone | BD; Bacto | 211705 | |
| Bacto yeast extract | BD; Bacto | 212705 | |
| Bleach | Generic | ||
| Calcium chloride dihydrate (CaCl2·2H2O) | Fisher Scientific | C79-500 | |
| Cholesterol | Fisher Scientific | C314-500 | |
| Deionized water (dH2O) | |||
| Glass Pasteur pipettes | Krackeler Scientific | 6-72050-900 | |
| Magnesium sulfate heptahydrate (MgSO4·7H2O) | Fisher Scientific | BP213-1 | |
| Potassium phosphate dibasic (K2HPO4) | Fisher Scientific | BP363-1 | |
| Potassium phosphate monobasic (KH2PO4) | Fisher Scientific | P285-500 | |
| Sodium chloride | Fisher Scientific | BP358-10 | |
| Sodium hydroxide (NaOH) | Fisher Scientific | BP359-500 | |
| Sodium phosphate dibasic anhydrous (Na2HPO4) | Fisher Scientific | BP332-1 |
Cite This Article
Nematode Synchronization: A Method to Obtain Populations of Worms in Identical Stages of Development. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20045, doi: (2023).