Nematode-Synchronisation: Eine Methode, um Populationen von Würmern in identischen Entwicklungsstadien zu erhalten
Published: April 30, 2023
Abstract
Quelle: Sarasija, S. und Norman, K. R. Messung der Sauerstoffverbrauchsraten in Intact Caenorhabditis elegans. J. Vis. (2019).
In diesem Video zeigen wir eine Methode zur Herstellung einer entwicklungssynchronisierten Population steriler erwachsener C. elegans. Das Beispielprotokoll synchronisiert Würmer, um die Sauerstoffverbrauchsraten bei lebenden Tieren zu untersuchen.
Protocol
Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Sarasija und Norman, Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2019). 1. Wachstum und Synchronisation der Nematodenpopulation Diese Tiere erreichen das L4-Larvenstadium nach 42 h. Zu diesem Zeitpunkt bewegen Sie die L4-Larven mit einem Platinpickel auf OP50-saatierte NGM-Platten, die 0,5 mg/ml 5-Fluor-2′-Deoxyuridin (FUdR) enthalten, um sie an der Pro…
Representative Results
Tabelle 1: Rezepte für NGM-Platten, M9-Puffer und Bleichlösung. M9-Puffer (1 L) dH2O 1.000 ml Nacl 5 g KH2PO4 3 g Na2HPO4 6 g<…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 100 mm; 60 mm Petri dishes | Kord-Valmark Labware Products | 2900; 2901 | |
| 15 mL conical tubes | Corning | 430791 | |
| 50 mL conical tubes | Corning | 430829 | |
| Agar | Fisher Scientific | BP1423-2 | |
| Bacto peptone | BD; Bacto | 211677 | |
| Bacto tryptone | BD; Bacto | 211705 | |
| Bacto yeast extract | BD; Bacto | 212705 | |
| Bleach | Generic | ||
| Calcium chloride dihydrate (CaCl2·2H2O) | Fisher Scientific | C79-500 | |
| Cholesterol | Fisher Scientific | C314-500 | |
| Deionized water (dH2O) | |||
| Glass Pasteur pipettes | Krackeler Scientific | 6-72050-900 | |
| Magnesium sulfate heptahydrate (MgSO4·7H2O) | Fisher Scientific | BP213-1 | |
| Potassium phosphate dibasic (K2HPO4) | Fisher Scientific | BP363-1 | |
| Potassium phosphate monobasic (KH2PO4) | Fisher Scientific | P285-500 | |
| Sodium chloride | Fisher Scientific | BP358-10 | |
| Sodium hydroxide (NaOH) | Fisher Scientific | BP359-500 | |
| Sodium phosphate dibasic anhydrous (Na2HPO4) | Fisher Scientific | BP332-1 |
Cite This Article
Nematode Synchronization: A Method to Obtain Populations of Worms in Identical Stages of Development. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20045, doi: (2023).