Nematode-Synchronisation: Eine Methode, um Populationen von Würmern in identischen Entwicklungsstadien zu erhalten

Published: April 30, 2023

Abstract

Quelle: Sarasija, S. und Norman, K. R. Messung der Sauerstoffverbrauchsraten in Intact Caenorhabditis elegansJ. Vis. (2019).

In diesem Video zeigen wir eine Methode zur Herstellung einer entwicklungssynchronisierten Population steriler erwachsener C. elegans. Das Beispielprotokoll synchronisiert Würmer, um die Sauerstoffverbrauchsraten bei lebenden Tieren zu untersuchen.

Protocol

Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Sarasija und Norman, Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2019). 1. Wachstum und Synchronisation der Nematodenpopulation Diese Tiere erreichen das L4-Larvenstadium nach 42 h. Zu diesem Zeitpunkt bewegen Sie die L4-Larven mit einem Platinpickel auf OP50-saatierte NGM-Platten, die 0,5 mg/ml 5-Fluor-2′-Deoxyuridin (FUdR) enthalten, um sie an der Pro…

Representative Results

Tabelle 1: Rezepte für NGM-Platten, M9-Puffer und Bleichlösung. M9-Puffer (1 L) dH2O 1.000 ml Nacl 5 g KH2PO4 3 g Na2HPO4 6 g<…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Materials

100 mm; 60 mm Petri dishes Kord-Valmark Labware Products 2900; 2901
15 mL conical tubes Corning 430791
50 mL conical tubes Corning 430829
Agar Fisher Scientific BP1423-2
Bacto peptone BD; Bacto 211677
Bacto tryptone BD; Bacto 211705
Bacto yeast extract BD; Bacto 212705
Bleach Generic
Calcium chloride dihydrate (CaCl2·2H2O) Fisher Scientific C79-500
Cholesterol Fisher Scientific C314-500
Deionized water (dH2O)
Glass Pasteur pipettes Krackeler Scientific 6-72050-900
Magnesium sulfate heptahydrate (MgSO4·7H2O) Fisher Scientific BP213-1
Potassium phosphate dibasic (K2HPO4) Fisher Scientific BP363-1
Potassium phosphate monobasic (KH2PO4) Fisher Scientific P285-500
Sodium chloride Fisher Scientific BP358-10
Sodium hydroxide (NaOH) Fisher Scientific BP359-500
Sodium phosphate dibasic anhydrous (Na2HPO4) Fisher Scientific BP332-1

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Cite This Article
Nematode Synchronization: A Method to Obtain Populations of Worms in Identical Stages of Development. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20045, doi: (2023).

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