Sincronização de Nematode: Um método para obter populações de vermes em estágios idênticos de desenvolvimento
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Sarasija, S. and Norman, K.R. Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2019).
Neste vídeo, mostramos um método de produção de uma população sincronizada de desenvolvimento de adultos estéreis C. elegans. O protocolo de exemplo sincroniza os vermes para estudar as taxas de consumo de oxigênio em animais vivos.
Protocol
Este protocolo é um trecho de Sarasija e Norman, Medição das Taxas de Consumo de Oxigênio em Cavímite Intacta elegans, J. Vis. Exp. (2019). 1. Crescimento e sincronização da população de nematoides Esses animais chegarão ao estágio larval L4 após ~42 h. Neste momento, mova as larvas L4 usando uma picareta de platina para placas de NGM semeadas OP50 contendo 0,5 mg/mL 5-fluoro-2′-desoxyuridina (FUdR) para impedi-las de p…
Representative Results
Tabela 1: Receitas para placas de NGM, tampão M9 e solução de alvejante. Tampão M9 (1 L) dH2O 1.000 mL NaCl 5 g KH2PO4 3 g Na2HPO4 …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 100 mm; 60 mm Petri dishes | Kord-Valmark Labware Products | 2900; 2901 | |
| 15 mL conical tubes | Corning | 430791 | |
| 50 mL conical tubes | Corning | 430829 | |
| Agar | Fisher Scientific | BP1423-2 | |
| Bacto peptone | BD; Bacto | 211677 | |
| Bacto tryptone | BD; Bacto | 211705 | |
| Bacto yeast extract | BD; Bacto | 212705 | |
| Bleach | Generic | ||
| Calcium chloride dihydrate (CaCl2·2H2O) | Fisher Scientific | C79-500 | |
| Cholesterol | Fisher Scientific | C314-500 | |
| Deionized water (dH2O) | |||
| Glass Pasteur pipettes | Krackeler Scientific | 6-72050-900 | |
| Magnesium sulfate heptahydrate (MgSO4·7H2O) | Fisher Scientific | BP213-1 | |
| Potassium phosphate dibasic (K2HPO4) | Fisher Scientific | BP363-1 | |
| Potassium phosphate monobasic (KH2PO4) | Fisher Scientific | P285-500 | |
| Sodium chloride | Fisher Scientific | BP358-10 | |
| Sodium hydroxide (NaOH) | Fisher Scientific | BP359-500 | |
| Sodium phosphate dibasic anhydrous (Na2HPO4) | Fisher Scientific | BP332-1 |
Cite This Article
Nematode Synchronization: A Method to Obtain Populations of Worms in Identical Stages of Development. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20045, doi: (2023).