Synchronisation des nématodes : une méthode pour obtenir des populations de vers à des stades identiques de développement
Published: April 30, 2023
Abstract
Source: Sarasija, S. et Norman, K. R. Mesure des taux de consommation d’oxygène à Intact Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2019).
Dans cette vidéo, nous montrons une méthode de production d’une population synchronisée sur le plan du développement de C. elegans adulte stérile. Le protocole d’exemple synchronise les vers pour étudier les taux de consommation d’oxygène chez les animaux vivants.
Protocol
Ce protocole est un extrait de Sarasija et Norman, Mesure des taux de consommation d’oxygène dans Intact Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2019). 1. Croissance et synchronisation de la population de nématodes Ces animaux atteindront le stade larvaire L4 après ~42 h. À cette époque, déplacez les larves de L4 à l’aide d’un pic de platine vers les plaques de NGM ensemencées OP50 contenant 0,5 mg/mL 5-fluoro-2′-deoxyu…
Representative Results
Tableau 1 : Recettes de plaques NGM, tampon M9 et solution d’eau de Javel. Tampon M9 (1 L) dH2O (en) 1 000 mL NaCl (NaCl) 5 g KH2PO4 (KH2PO4) 1 % <…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 100 mm; 60 mm Petri dishes | Kord-Valmark Labware Products | 2900; 2901 | |
| 15 mL conical tubes | Corning | 430791 | |
| 50 mL conical tubes | Corning | 430829 | |
| Agar | Fisher Scientific | BP1423-2 | |
| Bacto peptone | BD; Bacto | 211677 | |
| Bacto tryptone | BD; Bacto | 211705 | |
| Bacto yeast extract | BD; Bacto | 212705 | |
| Bleach | Generic | ||
| Calcium chloride dihydrate (CaCl2·2H2O) | Fisher Scientific | C79-500 | |
| Cholesterol | Fisher Scientific | C314-500 | |
| Deionized water (dH2O) | |||
| Glass Pasteur pipettes | Krackeler Scientific | 6-72050-900 | |
| Magnesium sulfate heptahydrate (MgSO4·7H2O) | Fisher Scientific | BP213-1 | |
| Potassium phosphate dibasic (K2HPO4) | Fisher Scientific | BP363-1 | |
| Potassium phosphate monobasic (KH2PO4) | Fisher Scientific | P285-500 | |
| Sodium chloride | Fisher Scientific | BP358-10 | |
| Sodium hydroxide (NaOH) | Fisher Scientific | BP359-500 | |
| Sodium phosphate dibasic anhydrous (Na2HPO4) | Fisher Scientific | BP332-1 |
Cite This Article
Nematode Synchronization: A Method to Obtain Populations of Worms in Identical Stages of Development. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20045, doi: (2023).