Nematod Senkronizasyonu: Gelişimin Özdeş Aşamalarında Solucan Popülasyonlarını Elde Etmek İçin Bir Yöntem
Published: April 30, 2023
Abstract
Kaynak: Sarasija, S. ve Norman, K. R. Intact Caenorhabditis elegans’ta Oksijen Tüketim Oranlarının Ölçümü. J. Vis. Exp. (2019).
Bu videoda, steril yetişkin C. eleganlarıngelişimsel olarak senkronize edilmiş bir popülasyonu üretme yöntemini gösteriyoruz. Örnek protokol, canlı hayvanlarda oksijen tüketim oranlarını incelemek için solucanları senkronize eder.
Protocol
Bu protokol Sarasija ve Norman’dan bir alıntıdır, Intact Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp’deOksijen Tüketim Oranlarının Ölçümü . (2019). 1. Nematod popülasyonunun büyümesi ve senkronizasyonu Bu hayvanlar ~ 42 saat sonra L4 larva aşamasına ulaşacaktır. Şu anda, L4 larvalarını platin bir toplama kullanarak, soy üretmelerini önlemek için 0,5 mg / mL 5-floro-2′-deoksidrin (FUdR) içeren OP50 tohumlu NGM plakal…
Representative Results
Tablo 1: NGM tabakları, M9 tamponu ve çamaşır suyu çözeltisi tarifleri. M9 arabelleği (1 L) dH2O 1.000 mL Nacl 5 g KH2PO4 3g Na2HPO4<…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 100 mm; 60 mm Petri dishes | Kord-Valmark Labware Products | 2900; 2901 | |
| 15 mL conical tubes | Corning | 430791 | |
| 50 mL conical tubes | Corning | 430829 | |
| Agar | Fisher Scientific | BP1423-2 | |
| Bacto peptone | BD; Bacto | 211677 | |
| Bacto tryptone | BD; Bacto | 211705 | |
| Bacto yeast extract | BD; Bacto | 212705 | |
| Bleach | Generic | ||
| Calcium chloride dihydrate (CaCl2·2H2O) | Fisher Scientific | C79-500 | |
| Cholesterol | Fisher Scientific | C314-500 | |
| Deionized water (dH2O) | |||
| Glass Pasteur pipettes | Krackeler Scientific | 6-72050-900 | |
| Magnesium sulfate heptahydrate (MgSO4·7H2O) | Fisher Scientific | BP213-1 | |
| Potassium phosphate dibasic (K2HPO4) | Fisher Scientific | BP363-1 | |
| Potassium phosphate monobasic (KH2PO4) | Fisher Scientific | P285-500 | |
| Sodium chloride | Fisher Scientific | BP358-10 | |
| Sodium hydroxide (NaOH) | Fisher Scientific | BP359-500 | |
| Sodium phosphate dibasic anhydrous (Na2HPO4) | Fisher Scientific | BP332-1 |
Cite This Article
Nematode Synchronization: A Method to Obtain Populations of Worms in Identical Stages of Development. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20045, doi: (2023).