Nematod Senkronizasyonu: Gelişimin Özdeş Aşamalarında Solucan Popülasyonlarını Elde Etmek İçin Bir Yöntem

Published: April 30, 2023

Abstract

Kaynak: Sarasija, S. ve Norman, K. R. Intact Caenorhabditis elegans’ta Oksijen Tüketim Oranlarının ÖlçümüJ. Vis. Exp. (2019).

Bu videoda, steril yetişkin C. eleganlarıngelişimsel olarak senkronize edilmiş bir popülasyonu üretme yöntemini gösteriyoruz. Örnek protokol, canlı hayvanlarda oksijen tüketim oranlarını incelemek için solucanları senkronize eder.

Protocol

Bu protokol Sarasija ve Norman’dan bir alıntıdır, Intact Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp’deOksijen Tüketim Oranlarının Ölçümü . (2019). 1. Nematod popülasyonunun büyümesi ve senkronizasyonu Bu hayvanlar ~ 42 saat sonra L4 larva aşamasına ulaşacaktır. Şu anda, L4 larvalarını platin bir toplama kullanarak, soy üretmelerini önlemek için 0,5 mg / mL 5-floro-2′-deoksidrin (FUdR) içeren OP50 tohumlu NGM plakal…

Representative Results

Tablo 1: NGM tabakları, M9 tamponu ve çamaşır suyu çözeltisi tarifleri. M9 arabelleği (1 L) dH2O 1.000 mL Nacl 5 g KH2PO4 3g Na2HPO4<…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Materials

100 mm; 60 mm Petri dishes Kord-Valmark Labware Products 2900; 2901
15 mL conical tubes Corning 430791
50 mL conical tubes Corning 430829
Agar Fisher Scientific BP1423-2
Bacto peptone BD; Bacto 211677
Bacto tryptone BD; Bacto 211705
Bacto yeast extract BD; Bacto 212705
Bleach Generic
Calcium chloride dihydrate (CaCl2·2H2O) Fisher Scientific C79-500
Cholesterol Fisher Scientific C314-500
Deionized water (dH2O)
Glass Pasteur pipettes Krackeler Scientific 6-72050-900
Magnesium sulfate heptahydrate (MgSO4·7H2O) Fisher Scientific BP213-1
Potassium phosphate dibasic (K2HPO4) Fisher Scientific BP363-1
Potassium phosphate monobasic (KH2PO4) Fisher Scientific P285-500
Sodium chloride Fisher Scientific BP358-10
Sodium hydroxide (NaOH) Fisher Scientific BP359-500
Sodium phosphate dibasic anhydrous (Na2HPO4) Fisher Scientific BP332-1

Play Video

Cite This Article
Nematode Synchronization: A Method to Obtain Populations of Worms in Identical Stages of Development. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20045, doi: (2023).

View Video