Sincronización de nematodos: un método para obtener poblaciones de gusanos en etapas idénticas de desarrollo
Published: April 30, 2023
Abstract
Fuente: Sarasija, S. y Norman, K. R. Medición de las tasas de consumo de oxígeno en Caenorhabditis Elegans intactas. J. Vis. (2019).
En este video, mostramos un método de producción de una población sincronizada del desarrollo de C. elegans adultos estériles. El protocolo de ejemplo sincroniza los gusanos para estudiar las tasas de consumo de oxígeno en animales vivos.
Protocol
Este protocolo es un extracto de Sarasija y Norman, Medición de las tasas de consumo de oxígeno en Caenorhabditis Elegans intactas, J. Vis. Exp. (2019). 1. Crecimiento y sincronización de la población de nematodos Estos animales llegarán a la etapa larvaria L4 después de ~ 42 h. En este momento, mueva las larvas L4 usando una selección de platino a placas NGM con semillas OP50 que contengan 0,5 mg/ml 5-fluoro-2′-deoxyuridina…
Representative Results
Tabla 1: Recetas para placas NGM, tampón M9 y solución de lejía. Búfer M9 (1 L) dH2O 1.000 ml NaCl 7 % KH2PO4 1 % Na2HPO4 4 …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 100 mm; 60 mm Petri dishes | Kord-Valmark Labware Products | 2900; 2901 | |
| 15 mL conical tubes | Corning | 430791 | |
| 50 mL conical tubes | Corning | 430829 | |
| Agar | Fisher Scientific | BP1423-2 | |
| Bacto peptone | BD; Bacto | 211677 | |
| Bacto tryptone | BD; Bacto | 211705 | |
| Bacto yeast extract | BD; Bacto | 212705 | |
| Bleach | Generic | ||
| Calcium chloride dihydrate (CaCl2·2H2O) | Fisher Scientific | C79-500 | |
| Cholesterol | Fisher Scientific | C314-500 | |
| Deionized water (dH2O) | |||
| Glass Pasteur pipettes | Krackeler Scientific | 6-72050-900 | |
| Magnesium sulfate heptahydrate (MgSO4·7H2O) | Fisher Scientific | BP213-1 | |
| Potassium phosphate dibasic (K2HPO4) | Fisher Scientific | BP363-1 | |
| Potassium phosphate monobasic (KH2PO4) | Fisher Scientific | P285-500 | |
| Sodium chloride | Fisher Scientific | BP358-10 | |
| Sodium hydroxide (NaOH) | Fisher Scientific | BP359-500 | |
| Sodium phosphate dibasic anhydrous (Na2HPO4) | Fisher Scientific | BP332-1 |
Cite This Article
Nematode Synchronization: A Method to Obtain Populations of Worms in Identical Stages of Development. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20045, doi: (2023).