Nematodensynchronisatie: een methode om populaties wormen in identieke stadia van ontwikkeling te verkrijgen
Published: April 30, 2023
Abstract
Bron: Sarasija, S. and Norman, K.R. Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans. J.Vis. Exp. (2019).
In deze video laten we een methode zien om een ontwikkelingsgesynchronleerde populatie steriele volwassen C. elegans teproduceren. Het voorbeeldprotocol synchroniseert wormen om zuurstofverbruik bij levende dieren te bestuderen.
Protocol
Dit protocol is een uittreksel uit Sarasija en Norman, Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2019). 1. Groei en synchronisatie van nematodenpopulatie Deze dieren bereiken het L4 larvale stadium na ~42 uur. Verplaats op dit moment de L4-larven met behulp van een platinapriem naar OP50 gezaaide NGM-platen met 0,5 mg/ml 5-fluoro-2′-deoxyuridine (FUdR) om te voorkomen dat ze nakomelinge…
Representative Results
Tabel 1: Recepten voor NGM-platen, M9-buffer en bleekoplossing. M9 buffer (1 L) dH2O 1.000 ml Nacl 5 g KH2PO4 3 g Na2HPO4 6 g</t…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 100 mm; 60 mm Petri dishes | Kord-Valmark Labware Products | 2900; 2901 | |
| 15 mL conical tubes | Corning | 430791 | |
| 50 mL conical tubes | Corning | 430829 | |
| Agar | Fisher Scientific | BP1423-2 | |
| Bacto peptone | BD; Bacto | 211677 | |
| Bacto tryptone | BD; Bacto | 211705 | |
| Bacto yeast extract | BD; Bacto | 212705 | |
| Bleach | Generic | ||
| Calcium chloride dihydrate (CaCl2·2H2O) | Fisher Scientific | C79-500 | |
| Cholesterol | Fisher Scientific | C314-500 | |
| Deionized water (dH2O) | |||
| Glass Pasteur pipettes | Krackeler Scientific | 6-72050-900 | |
| Magnesium sulfate heptahydrate (MgSO4·7H2O) | Fisher Scientific | BP213-1 | |
| Potassium phosphate dibasic (K2HPO4) | Fisher Scientific | BP363-1 | |
| Potassium phosphate monobasic (KH2PO4) | Fisher Scientific | P285-500 | |
| Sodium chloride | Fisher Scientific | BP358-10 | |
| Sodium hydroxide (NaOH) | Fisher Scientific | BP359-500 | |
| Sodium phosphate dibasic anhydrous (Na2HPO4) | Fisher Scientific | BP332-1 |
Cite This Article
Nematode Synchronization: A Method to Obtain Populations of Worms in Identical Stages of Development. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20045, doi: (2023).