Nematodensynchronisatie: een methode om populaties wormen in identieke stadia van ontwikkeling te verkrijgen

Published: April 30, 2023

Abstract

Bron: Sarasija, S. and Norman, K.R. Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegansJ.Vis. Exp. (2019).

In deze video laten we een methode zien om een ontwikkelingsgesynchronleerde populatie steriele volwassen C. elegans teproduceren. Het voorbeeldprotocol synchroniseert wormen om zuurstofverbruik bij levende dieren te bestuderen.

Protocol

Dit protocol is een uittreksel uit Sarasija en Norman, Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2019). 1. Groei en synchronisatie van nematodenpopulatie Deze dieren bereiken het L4 larvale stadium na ~42 uur. Verplaats op dit moment de L4-larven met behulp van een platinapriem naar OP50 gezaaide NGM-platen met 0,5 mg/ml 5-fluoro-2′-deoxyuridine (FUdR) om te voorkomen dat ze nakomelinge…

Representative Results

Tabel 1: Recepten voor NGM-platen, M9-buffer en bleekoplossing. M9 buffer (1 L) dH2O 1.000 ml Nacl 5 g KH2PO4 3 g Na2HPO4 6 g</t…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Materials

100 mm; 60 mm Petri dishes Kord-Valmark Labware Products 2900; 2901
15 mL conical tubes Corning 430791
50 mL conical tubes Corning 430829
Agar Fisher Scientific BP1423-2
Bacto peptone BD; Bacto 211677
Bacto tryptone BD; Bacto 211705
Bacto yeast extract BD; Bacto 212705
Bleach Generic
Calcium chloride dihydrate (CaCl2·2H2O) Fisher Scientific C79-500
Cholesterol Fisher Scientific C314-500
Deionized water (dH2O)
Glass Pasteur pipettes Krackeler Scientific 6-72050-900
Magnesium sulfate heptahydrate (MgSO4·7H2O) Fisher Scientific BP213-1
Potassium phosphate dibasic (K2HPO4) Fisher Scientific BP363-1
Potassium phosphate monobasic (KH2PO4) Fisher Scientific P285-500
Sodium chloride Fisher Scientific BP358-10
Sodium hydroxide (NaOH) Fisher Scientific BP359-500
Sodium phosphate dibasic anhydrous (Na2HPO4) Fisher Scientific BP332-1

Play Video

Cite This Article
Nematode Synchronization: A Method to Obtain Populations of Worms in Identical Stages of Development. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20045, doi: (2023).

View Video