Nematodesynkronisering: En metode for å få populasjoner av ormer i identiske utviklingsstadier
Published: April 30, 2023
Abstract
Kilde: Sarasija, S. og Norman, K. R. Måling av oksygenforbruk i intakt caenorhabditt elegans. J. Vis. Utt. (2019).
I denne videoen viser vi en metode for å produsere en utviklingssynkronisert befolkning av steril voksen C. elegans. Eksempelprotokollen synkroniserer ormer for å studere oksygenforbruk i levende dyr.
Protocol
Denne protokollen er et utdrag fra Sarasija og Norman, Måling av oksygenforbruk i intakt caenorhabditt elegans, J. Vis. Exp. (2019). 1. Vekst og synkronisering av nematodepopulasjon Disse dyrene vil nå L4 larvalstadiet etter ~ 42 timer. På dette tidspunktet flytter du L4-larvene ved hjelp av en platinaplukking til OP50 frø NGM-plater som inneholder 0,5 mg / ml 5-fluoro-2′-deoksyuridin (FUdR) for å forhindre at de produserer av…
Representative Results
Tabell 1: Oppskrifter på NGM-plater, M9-buffer og blekemiddelløsning. M9-buffer (1 L) dH2O 1000 ml Nacl 5 g KH2PO4 3 g Na2HPO4 <td…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 100 mm; 60 mm Petri dishes | Kord-Valmark Labware Products | 2900; 2901 | |
| 15 mL conical tubes | Corning | 430791 | |
| 50 mL conical tubes | Corning | 430829 | |
| Agar | Fisher Scientific | BP1423-2 | |
| Bacto peptone | BD; Bacto | 211677 | |
| Bacto tryptone | BD; Bacto | 211705 | |
| Bacto yeast extract | BD; Bacto | 212705 | |
| Bleach | Generic | ||
| Calcium chloride dihydrate (CaCl2·2H2O) | Fisher Scientific | C79-500 | |
| Cholesterol | Fisher Scientific | C314-500 | |
| Deionized water (dH2O) | |||
| Glass Pasteur pipettes | Krackeler Scientific | 6-72050-900 | |
| Magnesium sulfate heptahydrate (MgSO4·7H2O) | Fisher Scientific | BP213-1 | |
| Potassium phosphate dibasic (K2HPO4) | Fisher Scientific | BP363-1 | |
| Potassium phosphate monobasic (KH2PO4) | Fisher Scientific | P285-500 | |
| Sodium chloride | Fisher Scientific | BP358-10 | |
| Sodium hydroxide (NaOH) | Fisher Scientific | BP359-500 | |
| Sodium phosphate dibasic anhydrous (Na2HPO4) | Fisher Scientific | BP332-1 |
Cite This Article
Nematode Synchronization: A Method to Obtain Populations of Worms in Identical Stages of Development. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20045, doi: (2023).