Counting Colony Forming Units (CFU): Quantificazione dei batteri dai corpi di mosca
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Koyle, M. L., et al. J. Vis. Exp. (2016).
Drosophila microbiota influisce sullo sviluppo, l’immunità e la fisiologia dell’animale. Questo video descrive un metodo per quantificare i batteri dalle mosche determinando le unità di formazione della colonia da preparati per tutto il corpo. Il protocollo in primo piano dimostra la tecnica con le mosche, allevate in condizioni gnotobiotiche utilizzando quattro specie batteriche.
Protocol
Questo protocollo è un estratto da Koyle et al., Allevamento della Mosca della Frutta Drosophila melanogaster Sotto condizioni axeniche e gnotobiotiche, J. Vis. Exp. (2016). 1. Dechorionate Uova e Trasferimento a Dieta Sterile Preparare l’armadio per la biosicurezza spruzzando l’interno (compresi i lati) con il 70% di etanolo. Pulire il fondo con un tessuto da laboratorio e sterilizzare il cappuccio con luce UV per ~ 15 minuti. Sterilizzare tutte le fornit…
Representative Results
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Materials
| Brewer's Yeast | MP Biomedicals, LLC. | 903312 | |
| Glucose | Sigma Aldrich | 158968-3KG | |
| Agar | Fisher–Lab Scientific | fly802010 | |
| Welch's 100% Grape Juice Concentrate | Walmart or other grocery store | 9116196 | |
| Cage: 32 oz. Translucent Round Deli Container | Webstaurant Store | 999L5032Y | |
| Translucent Round Deli Container Lid | Webstaurant Store | 999YNL500 | |
| Stock Bottles | Genesee Scientific | 32-130 | |
| Droso-Plugs | Genesee Scientific | 49-101 | |
| Nylon Mesh | Genesee Scientific | 57-102 | |
| Plastic Bushing | Home Depot | 100404002 | |
| Plastic Bushing Cap | Home Depot | 100153897 | |
| Specimen Cup | MedSupply Partners | K01-207067 | |
| Repeater M4 | Eppendorf | 4982000322 | |
| 50 ml Centrifuge Tubes | TrueLine Centrifuge Tubes | TR2003 | |
| Food Boxes | USA Scientific | 2316-5001 | |
| Lysing Matrix D Bulk | MP Biomedicals, LLC. | 116540434 | |
| Filter Pipette Tips, 300 µl | USA Scientific | 1120-9810 | |
| Petri Dishes | Laboratory Product Sales | M089303 | |
| Ethanol | Decon Laboratories, INC. | 2701 | |
| Paintbrush | Walmart | 5133 | |
| Forceps | Fisher | 08-882 | |
| Household Bleach (6-8% Hypochlorite) | Walmart | 550646751 | |
| Universal Peptone | Genesee Scientific | 20-260 | |
| Yeast Extract | Fisher Scientific | BP1422-500 | |
| Dipotassium Phosphate | Sigma Aldrich | P3786-1KG | |
| Ammonium Citrate | Sigma Aldrich | 25102-500g | |
| Sodium Acetate | VWR | 97061-994 | |
| Magnesium Sulfate | Fisher Scientific | M63-500 | |
| Manganese Sulfate | Sigma Aldrich | 10034-96-5 | |
| MRS Powder | Sigma Aldrich | 69966-500G | |
| 96 Well Plate Reader | BioTek (Epoch) | NA | |
| 1.7 ml Centrifuge Tubes | USA Scientific | 1615-5500 | |
| Filter Pipette Tips, 1,000 µl | USA Scientific | 1122-1830 | |
| 96 Well Plates | Greiner Bio-One | 655101 | |
| Ceramic Beads | MP Biomedicals, LLC. | 6540-434 | |
| Tissue Homogenizer | MP Biomedicals, LLC. | 116004500 | |
| Class 1 BioSafety Cabinet | Thermo Scientific | Model 1395 |
Cite This Article
Counting Colony Forming Units (CFUs): Quantifying Bacteria from Fly Bodies. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20120, doi: (2023).