Koloni Şekillendirme Birimlerini Sayma (CFO'lar): Sinek Cisimlerinden Bakterileri Ölçme
Published: April 30, 2023
Abstract
Kaynak: Koyle, M. L., vd. Meyve Sineğinin Yetiştirılması & Amp; Drosophila melanogaster Axenic ve Gnotobiyotik Koşullar Altında. J. Vis. Exp. (2016).
Drosophila mikrobiyotası hayvanın gelişimini, bağışıklığını ve fizyolojisini etkiler. Bu videoda, koloni oluşturan birimleri tüm vücut preparatlarından belirleyerek sineklerden bakterileri ölçmek için bir yöntem açıklanmaktadır. Öne çıkan protokol, dört bakteri türü kullanılarak gnotobiyotik koşullar altında yetiştirilen sineklerle tekniği göstermektedir.
Protocol
Bu protokol Koyle ve ark.,Axenic ve Gnotobiotic Koşullar Altında Meyve Sineği Drosophila melanogaster Yetiştirme, J. Vis. Expbir alıntıdır. (2016). 1. Yumurtaları Kaynat ve Steril Diyete Aktar İç tarafları etanol ile püskürterek biyogüvenlik kabinini hazırlayın. Alt kısmı bir laboratuvar dokusuyla silin ve kaputu ~ 15 dakika boyunca UV ışığıyla sterilize edin. Etanol ile püskürtülerek ve hemen biyogüvenlik kabinine yerleştiri…
Representative Results
Ek Kod Dosyası: Örnek Hesaplamalar. Bu dosyayı görüntülemek için lütfen tıklayınız (İndirmek için sağ tıklayınız).
Materials
| Brewer's Yeast | MP Biomedicals, LLC. | 903312 | |
| Glucose | Sigma Aldrich | 158968-3KG | |
| Agar | Fisher–Lab Scientific | fly802010 | |
| Welch's 100% Grape Juice Concentrate | Walmart or other grocery store | 9116196 | |
| Cage: 32 oz. Translucent Round Deli Container | Webstaurant Store | 999L5032Y | |
| Translucent Round Deli Container Lid | Webstaurant Store | 999YNL500 | |
| Stock Bottles | Genesee Scientific | 32-130 | |
| Droso-Plugs | Genesee Scientific | 49-101 | |
| Nylon Mesh | Genesee Scientific | 57-102 | |
| Plastic Bushing | Home Depot | 100404002 | |
| Plastic Bushing Cap | Home Depot | 100153897 | |
| Specimen Cup | MedSupply Partners | K01-207067 | |
| Repeater M4 | Eppendorf | 4982000322 | |
| 50 ml Centrifuge Tubes | TrueLine Centrifuge Tubes | TR2003 | |
| Food Boxes | USA Scientific | 2316-5001 | |
| Lysing Matrix D Bulk | MP Biomedicals, LLC. | 116540434 | |
| Filter Pipette Tips, 300 µl | USA Scientific | 1120-9810 | |
| Petri Dishes | Laboratory Product Sales | M089303 | |
| Ethanol | Decon Laboratories, INC. | 2701 | |
| Paintbrush | Walmart | 5133 | |
| Forceps | Fisher | 08-882 | |
| Household Bleach (6-8% Hypochlorite) | Walmart | 550646751 | |
| Universal Peptone | Genesee Scientific | 20-260 | |
| Yeast Extract | Fisher Scientific | BP1422-500 | |
| Dipotassium Phosphate | Sigma Aldrich | P3786-1KG | |
| Ammonium Citrate | Sigma Aldrich | 25102-500g | |
| Sodium Acetate | VWR | 97061-994 | |
| Magnesium Sulfate | Fisher Scientific | M63-500 | |
| Manganese Sulfate | Sigma Aldrich | 10034-96-5 | |
| MRS Powder | Sigma Aldrich | 69966-500G | |
| 96 Well Plate Reader | BioTek (Epoch) | NA | |
| 1.7 ml Centrifuge Tubes | USA Scientific | 1615-5500 | |
| Filter Pipette Tips, 1,000 µl | USA Scientific | 1122-1830 | |
| 96 Well Plates | Greiner Bio-One | 655101 | |
| Ceramic Beads | MP Biomedicals, LLC. | 6540-434 | |
| Tissue Homogenizer | MP Biomedicals, LLC. | 116004500 | |
| Class 1 BioSafety Cabinet | Thermo Scientific | Model 1395 |
Cite This Article
Counting Colony Forming Units (CFUs): Quantifying Bacteria from Fly Bodies. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20120, doi: (2023).