콜로니 포밍 유닛 계산(CFU): 플라이 바디에서 박테리아를 정량화
Published: April 30, 2023
Abstract
출처: 코일, M. L., 외. 악센과 그노토바이오틱 조건 하에서 과일 플라이 & 드로소필라 멜라노가스터를 사육. J. 비스 익스펙. (2016).
Drosophila microbiota는 동물의 발달, 면역 및 생리학에 영향을 미칩니다. 이 비디오는 전신 제제에서 식민지 형성 단위를 결정하여 파리에서 박테리아를 정량화하는 방법을 설명합니다. 이 프로토콜은 4종의 세균성 종을 사용하여 노토바이오틱 조건에서 사육된 파리기술을 보여줍니다.
Protocol
이 프로토콜은 코일 외에서발췌, 악삭과 노토바이오틱 조건에서 과일 플라이 드로소필라 멜라노가스터를 사육, J. Vis. Exp. (2016). 1. 계란을 데초리오네이트하고 멸균 식단으로 이전 70%의 에탄올로 내부(측면 포함)를 분사하여 생물안전 캐비닛을 준비합니다. 실험실 조직으로 바닥을 닦고 UV 빛으로 후드를 15 분 동안 살균하십시오. 모든 비생물학적 ?…
Representative Results
추가 코드 파일: 샘플 계산. 이 파일을 보려면 여기를 클릭하십시오 (다운로드하려면 마우스 오른쪽 클릭).
Materials
| Brewer's Yeast | MP Biomedicals, LLC. | 903312 | |
| Glucose | Sigma Aldrich | 158968-3KG | |
| Agar | Fisher–Lab Scientific | fly802010 | |
| Welch's 100% Grape Juice Concentrate | Walmart or other grocery store | 9116196 | |
| Cage: 32 oz. Translucent Round Deli Container | Webstaurant Store | 999L5032Y | |
| Translucent Round Deli Container Lid | Webstaurant Store | 999YNL500 | |
| Stock Bottles | Genesee Scientific | 32-130 | |
| Droso-Plugs | Genesee Scientific | 49-101 | |
| Nylon Mesh | Genesee Scientific | 57-102 | |
| Plastic Bushing | Home Depot | 100404002 | |
| Plastic Bushing Cap | Home Depot | 100153897 | |
| Specimen Cup | MedSupply Partners | K01-207067 | |
| Repeater M4 | Eppendorf | 4982000322 | |
| 50 ml Centrifuge Tubes | TrueLine Centrifuge Tubes | TR2003 | |
| Food Boxes | USA Scientific | 2316-5001 | |
| Lysing Matrix D Bulk | MP Biomedicals, LLC. | 116540434 | |
| Filter Pipette Tips, 300 µl | USA Scientific | 1120-9810 | |
| Petri Dishes | Laboratory Product Sales | M089303 | |
| Ethanol | Decon Laboratories, INC. | 2701 | |
| Paintbrush | Walmart | 5133 | |
| Forceps | Fisher | 08-882 | |
| Household Bleach (6-8% Hypochlorite) | Walmart | 550646751 | |
| Universal Peptone | Genesee Scientific | 20-260 | |
| Yeast Extract | Fisher Scientific | BP1422-500 | |
| Dipotassium Phosphate | Sigma Aldrich | P3786-1KG | |
| Ammonium Citrate | Sigma Aldrich | 25102-500g | |
| Sodium Acetate | VWR | 97061-994 | |
| Magnesium Sulfate | Fisher Scientific | M63-500 | |
| Manganese Sulfate | Sigma Aldrich | 10034-96-5 | |
| MRS Powder | Sigma Aldrich | 69966-500G | |
| 96 Well Plate Reader | BioTek (Epoch) | NA | |
| 1.7 ml Centrifuge Tubes | USA Scientific | 1615-5500 | |
| Filter Pipette Tips, 1,000 µl | USA Scientific | 1122-1830 | |
| 96 Well Plates | Greiner Bio-One | 655101 | |
| Ceramic Beads | MP Biomedicals, LLC. | 6540-434 | |
| Tissue Homogenizer | MP Biomedicals, LLC. | 116004500 | |
| Class 1 BioSafety Cabinet | Thermo Scientific | Model 1395 |
Cite This Article
Counting Colony Forming Units (CFUs): Quantifying Bacteria from Fly Bodies. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20120, doi: (2023).