コロニー形成ユニット(CFUs):フライボディから細菌を定量化する
Published: April 30, 2023
Abstract
出典:コイル、M.L.、他の人は 無糖およびグノトバイオティック条件下でフルーツフライ&ショ ウジョウバエメラノガスター を飼育する。 J. ヴィス・エクス (2016).
ショウジョウバエ 微生物叢は、動物の発達、免疫および生理学に影響を与える。このビデオでは、全身製剤からコロニー形成ユニットを決定することによってハエから細菌を定量化する方法について説明します。注目のプロトコルは、4つの細菌種を使用してグノトバイオティクス条件下で飼育されたハエを用いた技術を実証する。
Protocol
このプロトコルは、Koyle らからの抜粋であり、無菌およびグノトビオティック条件下でのフルーツフライ ショウジョウバエメラノガスター の飼育 、J.Vis. Exp.(2016). 1. デコールリオネート卵と滅菌食への移行 70%エタノールを内部(側面を含む)にスプレーしてバイオセーフティキャビネットを準備します。ラボティッシュで底を拭き、約15分間UV光…
Representative Results
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Materials
| Brewer's Yeast | MP Biomedicals, LLC. | 903312 | |
| Glucose | Sigma Aldrich | 158968-3KG | |
| Agar | Fisher–Lab Scientific | fly802010 | |
| Welch's 100% Grape Juice Concentrate | Walmart or other grocery store | 9116196 | |
| Cage: 32 oz. Translucent Round Deli Container | Webstaurant Store | 999L5032Y | |
| Translucent Round Deli Container Lid | Webstaurant Store | 999YNL500 | |
| Stock Bottles | Genesee Scientific | 32-130 | |
| Droso-Plugs | Genesee Scientific | 49-101 | |
| Nylon Mesh | Genesee Scientific | 57-102 | |
| Plastic Bushing | Home Depot | 100404002 | |
| Plastic Bushing Cap | Home Depot | 100153897 | |
| Specimen Cup | MedSupply Partners | K01-207067 | |
| Repeater M4 | Eppendorf | 4982000322 | |
| 50 ml Centrifuge Tubes | TrueLine Centrifuge Tubes | TR2003 | |
| Food Boxes | USA Scientific | 2316-5001 | |
| Lysing Matrix D Bulk | MP Biomedicals, LLC. | 116540434 | |
| Filter Pipette Tips, 300 µl | USA Scientific | 1120-9810 | |
| Petri Dishes | Laboratory Product Sales | M089303 | |
| Ethanol | Decon Laboratories, INC. | 2701 | |
| Paintbrush | Walmart | 5133 | |
| Forceps | Fisher | 08-882 | |
| Household Bleach (6-8% Hypochlorite) | Walmart | 550646751 | |
| Universal Peptone | Genesee Scientific | 20-260 | |
| Yeast Extract | Fisher Scientific | BP1422-500 | |
| Dipotassium Phosphate | Sigma Aldrich | P3786-1KG | |
| Ammonium Citrate | Sigma Aldrich | 25102-500g | |
| Sodium Acetate | VWR | 97061-994 | |
| Magnesium Sulfate | Fisher Scientific | M63-500 | |
| Manganese Sulfate | Sigma Aldrich | 10034-96-5 | |
| MRS Powder | Sigma Aldrich | 69966-500G | |
| 96 Well Plate Reader | BioTek (Epoch) | NA | |
| 1.7 ml Centrifuge Tubes | USA Scientific | 1615-5500 | |
| Filter Pipette Tips, 1,000 µl | USA Scientific | 1122-1830 | |
| 96 Well Plates | Greiner Bio-One | 655101 | |
| Ceramic Beads | MP Biomedicals, LLC. | 6540-434 | |
| Tissue Homogenizer | MP Biomedicals, LLC. | 116004500 | |
| Class 1 BioSafety Cabinet | Thermo Scientific | Model 1395 |
Cite This Article
Counting Colony Forming Units (CFUs): Quantifying Bacteria from Fly Bodies. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20120, doi: (2023).