Analyse du gradient de température : méthode pour tester la préférence de température chez les larves de drosophiles

Abstract

Source : Liu, J., et coll. A Temperature Gradient Assay to Determine Thermal Preferences of Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (2018).

Les mouches des fruits drosophiles peuvent distinguer les petits changements de température et donc choisir des environnements avec des conditions thermiques favorables. Cette vidéo décrit un test comportemental qui teste la préférence de température des larves de Drosophila sur un gradient thermique linéaire.

Protocol

Ce protocole est un extrait de Liu et coll. A Temperature Gradient Assay to Determine Thermal Preferences of Drosophila Larvae, J. Vis. Exp. (2018). 1. Configuration du gradient de température Préparer le gradient unidirectnel Pour créer un environnement ambiant humide pendant les analyses, placez les deux blocs d’aluminium reliés à deux bains d’eau sur des serviettes en papier humide, séparées par 10 cm (figure 1</st…

Representative Results

Figure 1 : Configurations d’analyse de gradient simples et bidirectionnels. (A) Configuration de gradient monodirectdirectal avec deux plaques d’analyse en aluminium sur deux blocs d’aluminium. Les températures des blocs d’aluminium sont contrôlées par l’eau circulante de deux bains d’eau. (B) L’agencement des trois blocs d’aluminium, des bains d’eau et d’une plaque…

Materials

Gradient assay apparatus
PolyScience 9106, Refrigerated/Heated 6L Circulating Bath	Thomas Scientific	9106	This model is discontinued. Updated replacement models include: 1186R00 and 1197U04 for 120 V, 60 Hz, or 1184L08 and 1197U04 for 240 V, 50 Hz.
Aluminum assay plate (for single directional gradient)			Outer size: 14 x 10.1 x 0.9 cm, inner size: 12.9 x 8.7 x 0.8 cm, black anodized.
Aluminum plate (for bidirectional gradient)			25 x 22 x 0.2 cm, black anodized.
Aluminum block			Outer size: 25.5 x 5 x 1.4 cm, parameters of inner channels are shown in Figure 1D.
Connector for aluminum blocks and tubing	McMaster-Carr	91355K82
Tygon Sanitary Silicone Tubing	Tygon	57296	1/4" ID x 3/8" OD x 1/16" wall
Name	Company	Catalog Number	Comments
Items and reagents for assay
Pestle	USA Scientific	17361	Pestle for 1.5 mL microcentrifuge tubes
Thermometer	Fluke	51II
Thermocouple	Fluke	K type
Universal microplate lid	Corning	6980A77
35 mm dish	Corning	9380D40
Labeling tape (for bidirectional gradient)	Fisher Scientific	15-951	Fisherbrand labeling tape 2 in x 14 yds
Agarose	Invitrogen	16500500	Prepare 1% solution
Sucrose	Sigma	S0389-5KG	Prepare 18% solution right before starting assay
Paint brush	Fisher Scientific	11860
50 mL centrifuge tubes	Denville	C1062-P
Scoopula	Fisher Scientific	14-357Q
500 mL round wide-mouth bottle	Pyrex	1395-500
Cell strainer (300 mm pore)	PluriSelect	43-50300	Optional item for larvae washing
Cardboard box (vial tray)	Genesee Scientific	FS32-124