Оценка температуры: метод проверки температурных предпочтений в Drosophila Larvae
Published: April 30, 2023
Abstract
Источник: Лю, J., и др. Температура Градиент анализа для определения тепловых предпочтений Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (2018).
Дрозофила плодовых мушек может различать небольшие изменения температуры и, следовательно, выбрать среды с благоприятными тепловыми условиями. Это видео описывает поведенческий анализ, который проверяет температурные предпочтения личинок дрозофилы на линейном тепловом градиенте.
Protocol
Этот протокол является выдержкой из Лю и др. Оценка температуры для определения тепловых предпочтений Drosophila Larvae, J. Vis. Exp. (2018). 1. Установка градиента температуры Подготовка однона направление градиента Для создания влажной окружающей среды во врем…
Representative Results
Рисунок 1: Однонаправленные и двунаправленные установки анализа градиентов. (A) Однонаправлениюная градиентная установка с двумя алюминиевыми анализными пластинами на двух алюминиевых блоках. Температура алюминиевых бло…
Materials
| Gradient assay apparatus | |||
| PolyScience 9106, Refrigerated/Heated 6L Circulating Bath | Thomas Scientific | 9106 | This model is discontinued. Updated replacement models include: 1186R00 and 1197U04 for 120 V, 60 Hz, or 1184L08 and 1197U04 for 240 V, 50 Hz. |
| Aluminum assay plate (for single directional gradient) | Outer size: 14 x 10.1 x 0.9 cm, inner size: 12.9 x 8.7 x 0.8 cm, black anodized. | ||
| Aluminum plate (for bidirectional gradient) | 25 x 22 x 0.2 cm, black anodized. | ||
| Aluminum block | Outer size: 25.5 x 5 x 1.4 cm, parameters of inner channels are shown in Figure 1D. | ||
| Connector for aluminum blocks and tubing | McMaster-Carr | 91355K82 | |
| Tygon Sanitary Silicone Tubing | Tygon | 57296 | 1/4" ID x 3/8" OD x 1/16" wall |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Items and reagents for assay | |||
| Pestle | USA Scientific | 17361 | Pestle for 1.5 mL microcentrifuge tubes |
| Thermometer | Fluke | 51II | |
| Thermocouple | Fluke | K type | |
| Universal microplate lid | Corning | 6980A77 | |
| 35 mm dish | Corning | 9380D40 | |
| Labeling tape (for bidirectional gradient) | Fisher Scientific | 15-951 | Fisherbrand labeling tape 2 in x 14 yds |
| Agarose | Invitrogen | 16500500 | Prepare 1% solution |
| Sucrose | Sigma | S0389-5KG | Prepare 18% solution right before starting assay |
| Paint brush | Fisher Scientific | 11860 | |
| 50 mL centrifuge tubes | Denville | C1062-P | |
| Scoopula | Fisher Scientific | 14-357Q | |
| 500 mL round wide-mouth bottle | Pyrex | 1395-500 | |
| Cell strainer (300 mm pore) | PluriSelect | 43-50300 | Optional item for larvae washing |
| Cardboard box (vial tray) | Genesee Scientific | FS32-124 |
Cite This Article
Temperature Gradient Assay: A Method to Test Temperature Preference in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20147, doi: (2023).