בדיקת חום הדרגתית: שיטה לבדיקת העדפת טמפרטורה בזחלי דרוזופילה

Published: April 30, 2023

Abstract

מקור: ליו, J., ואח ‘. בדיקת שיפוע טמפרטורה כדי לקבוע העדפות תרמיות של זחלים Drosophila. ג’יי ויס אקספ. (2018).

זבובי פירות Drosophila יכול להבחין שינויים קטנים בטמפרטורה ולכן בחר סביבות עם תנאים תרמיים נוחים. סרטון זה מתאר בדיקה התנהגותית הבודקת את העדפת הטמפרטורה של זחלי דרוזופילה על שיפוע תרמי ליניארי.

Protocol

פרוטוקול זה הוא קטע מתוך ליו ואח ‘. בדיקת שיפוע טמפרטורה לקביעת העדפות תרמיות של זחלי דרוזופילה, J. Vis. Exp. (2018). 1. הגדרת מעבר צבע בטמפרטורה הכנת מעבר צבע חד-כיווני ליצירת סביבת סביבה לחה במהלך מבחני האדון, הניחו את שני גושי האלומיניום המחוברים לשתי אמבטי?…

Representative Results

איור 1: הגדרות של מבחני מעבר צבע יחיד ודו-כיווני. (A) הגדרת שיפוע חד כיוונית עם שתי לוחות מבחני אלומיניום על שני גושי אלומיניום. הטמפרטורות של גושי האלומיניום נשלטות על ידי מים במחזור משתי אמבטיות מים. (ב) סידור שלושת גו…

Materials

Gradient assay apparatus
PolyScience 9106, Refrigerated/Heated 6L Circulating Bath Thomas Scientific 9106 This model is discontinued. Updated replacement models include: 1186R00 and 1197U04 for 120 V, 60 Hz, or 1184L08 and 1197U04 for 240 V, 50 Hz.
Aluminum assay plate (for single directional gradient) Outer size: 14 x 10.1 x 0.9 cm, inner size: 12.9 x 8.7 x 0.8 cm, black anodized.
Aluminum plate (for bidirectional gradient) 25 x 22 x 0.2 cm, black anodized.
Aluminum block Outer size: 25.5 x 5 x 1.4 cm, parameters of inner channels are shown in Figure 1D.
Connector for aluminum blocks and tubing McMaster-Carr 91355K82
Tygon Sanitary Silicone Tubing Tygon 57296 1/4" ID x 3/8" OD x 1/16" wall
Name Company Catalog Number Comments
Items and reagents for assay
Pestle USA Scientific 17361 Pestle for 1.5 mL microcentrifuge tubes
Thermometer Fluke 51II
Thermocouple Fluke K type
Universal microplate lid Corning 6980A77
35 mm dish Corning 9380D40
Labeling tape (for bidirectional gradient) Fisher Scientific 15-951 Fisherbrand labeling tape 2 in x 14 yds
Agarose Invitrogen 16500500 Prepare 1% solution
Sucrose Sigma S0389-5KG Prepare 18% solution right before starting assay
Paint brush Fisher Scientific 11860
50 mL centrifuge tubes Denville C1062-P
Scoopula Fisher Scientific 14-357Q
500 mL round wide-mouth bottle Pyrex 1395-500
Cell strainer (300 mm pore) PluriSelect 43-50300 Optional item for larvae washing
Cardboard box (vial tray) Genesee Scientific FS32-124

Play Video

Cite This Article
Temperature Gradient Assay: A Method to Test Temperature Preference in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20147, doi: (2023).

View Video