Ensaio de gradiente de temperatura: um método para testar a preferência de temperatura em larvas de drosophila
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Liu, J., et al. A Temperature Gradient Assay to Determine Thermal Preferences of Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (2018).
As moscas frutíferas de drosophila podem distinguir pequenas mudanças de temperatura e, portanto, selecionar ambientes com condições térmicas favoráveis. Este vídeo descreve um ensaio comportamental que testa a preferência de temperatura das larvas de Drosophila em um gradiente térmico linear.
Protocol
Este protocolo é um trecho de Liu et al. Um ensaio de gradiente de temperatura para determinar preferências térmicas de Larvas de Drosophila, J. Vis. Exp. (2018). 1. Configuração do gradiente de temperatura Prepare o gradiente unidirecional Para criar um ambiente ambiente úmido durante os ensaios, coloque os dois blocos de alumínio conectados a dois banhos de água em toalhas de papel molhadas, separados por 10 cm(Figura …
Representative Results
Figura 1: Configurações de ensaio de gradiente gradiente único e bidirecional. (A) Configuração de gradiente unidirecional com duas placas de ensaio de alumínio em dois blocos de alumínio. As temperaturas dos blocos de alumínio são controladas pela água circulante de dois banhos de água. (B) O arranjo dos três blocos de alumínio, banhos de água e uma placa de alumínio (250 …
Materials
| Gradient assay apparatus | |||
| PolyScience 9106, Refrigerated/Heated 6L Circulating Bath | Thomas Scientific | 9106 | This model is discontinued. Updated replacement models include: 1186R00 and 1197U04 for 120 V, 60 Hz, or 1184L08 and 1197U04 for 240 V, 50 Hz. |
| Aluminum assay plate (for single directional gradient) | Outer size: 14 x 10.1 x 0.9 cm, inner size: 12.9 x 8.7 x 0.8 cm, black anodized. | ||
| Aluminum plate (for bidirectional gradient) | 25 x 22 x 0.2 cm, black anodized. | ||
| Aluminum block | Outer size: 25.5 x 5 x 1.4 cm, parameters of inner channels are shown in Figure 1D. | ||
| Connector for aluminum blocks and tubing | McMaster-Carr | 91355K82 | |
| Tygon Sanitary Silicone Tubing | Tygon | 57296 | 1/4" ID x 3/8" OD x 1/16" wall |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Items and reagents for assay | |||
| Pestle | USA Scientific | 17361 | Pestle for 1.5 mL microcentrifuge tubes |
| Thermometer | Fluke | 51II | |
| Thermocouple | Fluke | K type | |
| Universal microplate lid | Corning | 6980A77 | |
| 35 mm dish | Corning | 9380D40 | |
| Labeling tape (for bidirectional gradient) | Fisher Scientific | 15-951 | Fisherbrand labeling tape 2 in x 14 yds |
| Agarose | Invitrogen | 16500500 | Prepare 1% solution |
| Sucrose | Sigma | S0389-5KG | Prepare 18% solution right before starting assay |
| Paint brush | Fisher Scientific | 11860 | |
| 50 mL centrifuge tubes | Denville | C1062-P | |
| Scoopula | Fisher Scientific | 14-357Q | |
| 500 mL round wide-mouth bottle | Pyrex | 1395-500 | |
| Cell strainer (300 mm pore) | PluriSelect | 43-50300 | Optional item for larvae washing |
| Cardboard box (vial tray) | Genesee Scientific | FS32-124 |
Cite This Article
Temperature Gradient Assay: A Method to Test Temperature Preference in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20147, doi: (2023).