Deze video beschrijft een traditionele, op platen gebaseerde methode om de levensduur van C. elegans te meten. Het voorbeeldprotocol meet de levensduur van wormen die met RNAi worden behandeld.
Protocol
Het volgende protocol is een uittreksel uit Cornwell et al, The Replica Set Method: A High-throughput Approach to Quantitatively Measure Caenorhabditis elegans Lifespan, J. Vis. Exp. (2018). 1. Voorkomen van nakomelingenproductie door toevoeging van 5-Fluoro-2′-deoxyuridine (FUdR) Kweek dieren tot het L4-stadium bij 20 °C. Controleer…
Representative Results
Figuur 1: De traditionele en de replicasetmethode voor het scoren van de levensduur van C.elegans (A). De traditionele methode voor het scoren van C. elegans levensduur. Verschillende kleine gesynchroniseerde populaties van isogene dieren per aandoening worden in de loop van de tijd gevolgd. Dezelfde populatie dieren wordt gedurende de hele studie gevol…
Materials
FuDR (5-Fluoro-2'-deoxyuridine)
Alfa Aesar
L16497
24 Well Culture Plates
Greiner Bio-One
#662102
600 µL 96-well plates
Greiner Bio-One
#786261
2mL 96-well plates
Greiner Bio-One
#780286
96-pin plate replicator
Nunc
250520
C. elegans RNAi clone library in HT115 bacteria- Ahringer
Source Bioscience
C. elegans RNAi Collection (Ahringer)
See also Kamath et. al, Nature 2003.
C. elegans RNAi clone library in HT115 bacteria- Vidal
Source Bioscience
C. elegans ORF-RNAi Resource (Vidal)
See also Rual et. al, Genome Research 2004. This library is also available from Dharmacon.