Abstract
Fonte: Cornwell, A.B., et al. O Método de Conjunto de Réplicas: Uma Abordagem de alto rendimento para medir quantitativamente caenorhabditis elegans lifespan. J. Vis. Exp. (2018).
Este vídeo descreve um método tradicional, baseado em placas, de medir a vida útil de C. elegans. O protocolo de exemplo mede a vida útil dos vermes tratados com RNAi.
Protocol
O seguinte protocolo é um trecho de Cornwell et al, The Replica Set Method: A High-throughput Approach to Quantitatively Measure Caenorhabditis elegans Lifespan, J. Vis. Exp. (2018). 1. Prevenção da produção de progênero pela adição de 5-Fluoro-2′-desoxyuridina (FUdR) Cresça animais até a etapa L4 a 20 °C. Verifique se os a…
Representative Results
Figura 1: O Método Tradicional e o Conjunto de Réplicas para pontuação de vida útil C.elegans (A). O Método Tradicional para marcar A vida útil de C. elegans. Várias pequenas populações sincronizadas de animais isogênicos por condição são seguidas ao longo do tempo. A mesma população de animais é acompanhada ao longo do curso de estudo…
Materials
| FuDR (5-Fluoro-2'-deoxyuridine) | Alfa Aesar | L16497 | |
| 24 Well Culture Plates | Greiner Bio-One | #662102 | |
| 600 µL 96-well plates | Greiner Bio-One | #786261 | |
| 2mL 96-well plates | Greiner Bio-One | #780286 | |
| 96-pin plate replicator | Nunc | 250520 | |
| C. elegans RNAi clone library in HT115 bacteria- Ahringer | Source Bioscience | C. elegans RNAi Collection (Ahringer) | See also Kamath et. al, Nature 2003. |
| C. elegans RNAi clone library in HT115 bacteria- Vidal | Source Bioscience | C. elegans ORF-RNAi Resource (Vidal) | See also Rual et. al, Genome Research 2004. This library is also available from Dharmacon. |
| L4440 Empty Vector Plasmid | Addgene | 1654 | https://www.addgene.org/1654/ |
Cite This Article
Lifespan Analysis: Measuring C. elegans Longevity. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20155, doi: (2023).