Levetidsanalyse: Måling av C. elegans Lang levetid

Published: April 30, 2023

Abstract

Kilde: Cornwell, A.B., et al. Replica Set-metoden: En høy gjennomstrømningstilnærming for kvantitativt måling av Caenorhabditis elegans levetidJ. Vis. Utt.  (2018).

Denne videoen beskriver en tradisjonell, platebasert metode for å måle levetiden til C. elegans. Eksempelprotokollen måler levetiden til ormer behandlet med RNAi.

Protocol

Følgende protokoll er et utdrag fra Cornwell et al, The Replica Set Method: A High-throughput Approach to Quantitatively Measure Caenorhabditis elegans Lifespan, J. Vis. Exp.  (2018). 1. Forhindre avkomproduksjon ved tilsetning av 5-Fluoro-2′-deoksyuridin (FUdR) Dyr dyr til L4 stadium ved 20 °C. Kontroller om synkroniserte dyr har ut…

Representative Results

Figur 1: Den tradisjonelle metoden og replikasettet for å skåre C.elegans levetid (A). Den tradisjonelle metoden for å score C. elegans levetid. Flere små synkroniserte populasjoner av isogene dyr per tilstand følges over tid. Den samme populasjonen av dyr følges gjennom hele studiekurset. Levedyktighet vurderes ved bevegelse, som kan stimuleres a…

Materials

FuDR (5-Fluoro-2'-deoxyuridine) Alfa Aesar L16497
24 Well Culture Plates Greiner Bio-One #662102
600 µL 96-well plates Greiner Bio-One #786261
2mL 96-well plates Greiner Bio-One #780286
96-pin plate replicator Nunc 250520
C. elegans RNAi clone library in HT115 bacteria- Ahringer Source Bioscience C. elegans RNAi Collection (Ahringer) See also Kamath et. al, Nature 2003.
C. elegans RNAi clone library in HT115 bacteria- Vidal Source Bioscience C. elegans ORF-RNAi Resource (Vidal) See also Rual et. al, Genome Research 2004. This library is also available from Dharmacon.
L4440 Empty Vector Plasmid Addgene 1654 https://www.addgene.org/1654/

Play Video

Cite This Article
Lifespan Analysis: Measuring C. elegans Longevity. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20155, doi: (2023).

View Video