zPDX-侵入性分析：研究斑马鱼胚胎Xenografts转移性癌细胞的侵入行为

斑马鱼胚胎异种移植物有助于研究癌细胞入侵。通过将荧光标记的转移性癌细胞和非癌细胞注射到两个转基因胚胎的外围空间，准备异种移植模型。围线空间是胚胎边缘和蛋黄囊之间的空间。让胚胎在所需的时期内生长。

在此期间，转移性癌细胞在注射部位发生剧烈分裂，而非癌细胞保持稳定。孵化后，使用巴氏杆移液器将胚胎转移到玻璃底悬浮盘中。去除多余的卵水，将胚胎放置在所需的位置进行成像。在盘子顶部留一个盖子滑动，并将盘子放在明亮的场显微镜下。

捕捉图像并分析两种类型的细胞的侵入行为。转移性癌细胞往往从注射部位侵入血管。它们沿着循环移动，然后侵入周围的组织以增殖。相比之下，非癌细胞仍留在注射部位。在示例协议中，我们将将乳腺癌细胞注射到斑马鱼异种移植模型中 Cuvier 的近视空间和管道中，以研究转移。

要可视化转移，使用巴氏杆菌移液器，将注射的斑马鱼胚胎转移到玻璃底聚苯乙烯盘中，并去除多余的蛋水。用聚焦显微镜将胚胎的整个身体图像设置为低倍率，以获得肿瘤细胞传播的一般模式。

使用 488 纳米激光可视化斑马鱼胚胎血管和 543 纳米激光，可视化标有红色荧光标记的植入肿瘤细胞。接下来，用八到十个步骤扫描胚胎，以获得高质量的图像。