Encyclopedia of Experiments: Cancer Research
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제브라피쉬 배아 이종이이식은 암세포 침입을 연구하는 데 유용합니다. 형광으로 표지된 전이성 암세포와 비암세포를 두 개의 형질식 배아의 인식 공간에 주입하여 이종이 이식 모델을 준비한다. 인식 공간은 배아 페라이더름과 노른자 낭 사이의 공간입니다. 배아가 원하는 기간 동안 자랄 수 있도록 하십시오.
이 기간 동안, 전이성 암세포는 비암세포가 안정적으로 유지되는 동안 주사 부위에서 공격적으로 나눕니다. 인큐베이션 후 파스퇴르 파이펫을 사용하여 배아를 유리 바닥 서스펜션 접시로 옮습니다. 과도한 달걀 물을 제거하고 이미징을 위해 원하는 위치에 배아를 배치합니다. 접시 위에 덮개 슬립을 유지하고 밝은 필드 현미경 아래에 접시를 놓습니다.
이미지를 캡처하고 두 유형의 셀의 침습적 행동을 분석합니다. 전이성 암세포는 주사 부위에서 혈관을 침입하는 경향이 있다. 그(것)들은 순환을 따라 움직이고, 그 때 확산하기 위하여 주변 조직으로 침략합니다. 대조적으로, 비 암 세포는 주사의 사이트에 남아 있습니다. 예제 프로토콜에서, 우리는 전이를 연구하기 위하여 제브라피시 xenograft 모형에 있는 Cuvier의 인식 공간 및 덕트에 유방암 세포를 주입할 것입니다.
전이를 저온 살균기 파이펫으로 시각화하려면 주입 된 제브라피시 배아를 유리 바닥 폴리스티렌 접시에 옮기고 과도한 달걀 물을 제거하십시오. 종양 세포 보급의 일반적인 패턴을 얻기 위하여 낮은 배율로 설정된 공초점 현미경을 가진 태아의 전신을 화상.
488 나노미터 레이저를 사용하여 제브라피시 배아 혈관과 543 나노미터 레이저를 사용하여 적색 형광 마커로 표지된 이식된 종양 세포를 시각화합니다. 다음으로, 배아를 8~10단계로 스캔하여 고품질 의 이미지를 획득한다.
