Journal
/
/
טיהור צעד אחד של חלבונים מתויגים-Twin-סטרפטוקוקוס והמתחמים שלהם בSuberate (BS3) שרף סטרפטוקוקוס-Tactin הצולב עם Bis (sulfosuccinimidyl)
JoVE Journal
Biology
Author Produced
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
One-step Purification of Twin-Strep-tagged Proteins and Their Complexes on Strep-Tactin Resin Cross-linked With Bis(sulfosuccinimidyl) Suberate (BS3)
DOI:

18:27 min

April 20, 2014

, , ,

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:11Introduction
  • 01:32Overview
  • 01:37Competitive Elution with Biotin
  • 02:44Denaturing Elution with SDS
  • 03:26Chemical Cross-linking of the Resin
  • 04:10Protocol
  • 04:13Cross-linking of the Resin with BS3
  • 07:22Quenching of the Cross-linking Reaction
  • 09:50Binding of the Bait Protein and Associated Complexes to the Resin
  • 12:18Washing of the Resin
  • 14:23Elution of Specific Protein Complexes
  • 15:32Representative Results
  • 17:18Conclusion

Summary

Automatic Translation

שיטה מתוארת לניקוי יעיל של חלבוני תאום סטרפטוקוקוס מתויג היתוך והמתחמים הספציפיים שלהם על streptavidin הותאם שרף (סטרפטוקוקוס-Tactin) קוולנטית צולבים עם Bis suberate (sulfosuccinimidyl) (BS3). יש שיטת היתרונות של מהירות מהירה, התאוששות חלבון מטרה טובה וטוהר גבוהים, והוא תואם את ניתוח שלאחר מכן על ידי ספקטרומטריית מסה.

Related Videos

Read Article