Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove

13.7: Proofreading
INDICE DEI
CONTENUTI

JoVE Core
Biology

A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 20 seconds.

Education
Proofreading
 
Trascrizione

13.7: Proofreading

Panoramica

La sintesi di nuove molecole di DNA inizia quando la polimerasi del DNA collega i nucleotidi in una sequenza complementare al filamento di DNA del modello. La polimerasi del DNA ha una maggiore affinità per la base corretta per garantire la fedeltà nella replicazione del DNA. La polimerasi del DNA inoltre revisiona durante la replicazione, utilizzando un dominio di esonucleasi che taglia i nucleotidi errati dal filamento di DNA nascente.

Gli errori durante la replicazione vengono corretti dall'enzima DNA Polimerasi

Il DNA genomico è sintetizzato nella direzione da 5 a 3'. Ogni cellula contiene un numero di polimerasi del DNA che svolgono ruoli diversi nel sintetizzare e correggere gli errori nel DNA; Il delta e l'epsilon della polimerasi del DNA possiedono capacità di correzione delle bozze durante la replica del DNA nucleare. Queste polimerasi "leggono" ogni base dopo che è stato aggiunto al nuovo filo. Se la base appena aggiunta non è corretta, la polimerasi inverte la direzione (passando da 3' a 5') e utilizza un dominio di esonucleasi per tagliare la base errata. Successivamente, viene sostituito con la base corretta.

Le mutazioni nel dominio Esonucleasi della polimerasi del DNA sono collegate ai tumori

La correzione è importante per evitare che si verifichino mutazioni nel DNA appena sintetizzato, ma cosa succede quando il meccanismo di correzione fallisce? Quando una mutazione altera il dominio esonucleasi della polimerasi del DNA, perde la capacità di rimuovere i nucleotidi errati. Di conseguenza, le mutazioni possono accumularsi rapidamente in tutto il genoma. Questo tipo di mutazione è stato collegato a vari tipi di cancro.

La polimerasi del DNA a bassa fedeltà può generare sequenze di DNA mutate

Le polimerasi del DNA modificate sono utilizzate nella scienza di laboratorio per la reazione a catena della polimerasi (PCR), una tecnica in vitro per fare molte copie di frammenti specifici di DNA. Mentre le polimerasi ad alta fedeltà vengono utilizzate quando è importante che il prodotto finale sia perfetto, alcune tecniche, come la PCR soggetta a errori, cercano di generare mutazioni in un tratto di DNA di proposito. Queste tecniche utilizzano polimerasi che hanno compromesso l'abilità di correzione delle bozze.


Lettura consigliata

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter