生物分子相互作用检测技术

在本视频中，我们介绍了用于检测和量化蛋白质-蛋白质相互作用的场效应生物传感 （FEB） 技术。固定在石墨烯生物传感器上的靶蛋白与溶液中的分析物蛋白相互作用，导致 FEB...

在本视频中，我们演示了使用质谱法研究流通室中的抗原-抗体相互作用。聚焦光根据分子的质量以不同的方式散射。检测器收集散射光并生成干涉图样，这些光斑强度各不相同，与分子量相关。...

该视频介绍了 FLIM-FRET 成像技术，用于确定表达荧光蛋白、供体 eGFP 和受体 mCherry...

在本视频中，我们演示了通过 HEK 细胞聚集测定法测量突触细胞粘附分子之间跨细胞相互作用的技术。在该测定中，将表达所需突触前细胞粘附分子和荧光蛋白的相同数量的 HEK 细胞与表达突触后细胞粘附分子和另一种荧光蛋白的 HEK...

该视频介绍了用于研究线虫细胞中原位蛋白质-蛋白质相互作用的邻位连接测定。目标蛋白质的紧密接近在连接到二抗的 PLA 探针的帮助下生成环状 DNA 模板。使用扩增溶液进一步扩增探针，产生长单链...

该视频演示了 PVDF 膜上用于蛋白质-蛋白质相互作用分析的免疫共沉淀蛋白质复合物。用胰蛋白酶处理复合物中的还原蛋白，以切割较小肽段上的单个蛋白质，然后从 PVDF...

在本视频中，我们演示了生物膜干涉测量 （BLI） 技术，用于实时检测配体和目标分析物之间的分子间相互作用。BLI...

该视频演示了如何使用荧光波动光谱来检测细胞间接触时细胞表面蛋白之间的相互作用。通过表达用荧光蛋白标记的目标跨膜粘附受体，并混合带有两个光谱分离荧光标记的两个不同细胞群，通过荧光强度波动的交叉相关来评估具有不同颜色荧光的两个相邻细胞的受体之间的反式相互作用。...

在本视频中，我们演示了一种使用包被抗 GFP 抗体的微珠对 GFP 标记的野生型和突变的 PD-1 蛋白进行免疫共沉淀的技术。微珠结合的 PD-1-GFP 蛋白与与 PD-1 相互作用的 SHP2 蛋白一起孵育，从而能够识别 PD-1 中在 SHP2...

该视频介绍了一种基于 ELISA...

该视频演示了一种电导生物传感器检测，用于研究抗体与固定在传感器芯片上的靶抗原的相互作用。该生物传感器被设计为具有双功能嵌合蛋白——一种β-内酰胺酶，具有与纳米抗体融合的功能性催化位点，以便与固定的靶抗原结合。结合后，β-内酰胺酶对抗生素底物的催化水解产生电信号，证实抗原-抗体相互作用。...

该视频演示了一种使用生物素化细胞穿透肽来检测细胞内蛋白质-蛋白质相互作用的技术。细胞穿透肽促进偶联肽进入细胞并与其相互作用的蛋白质特异性结合。生物素与亲和素结合后，可以从细胞裂解物中纯化相互作用的蛋白质复合物。...

该视频演示了用于检测特定蛋白质自身相互作用的酵母双杂交检测。在该测定中，目标蛋白质被标记到编码...

该视频演示了串联亲和纯化 —...

该视频介绍了使用传感器芯片研究两个分子之间相互作用的表面等离子体共振 （SPR）...

该视频介绍了核磁共振波谱技术，用于研究 15个 N 标记的野生型和突变型 envoplakin 蛋白与未标记的 vimentin 蛋白之间的蛋白质-蛋白质相互作用。野生型 envoplakin 和 vimentin 之间的成功相互作用导致 NMR 波谱中广泛的谱线展宽和峰消失，而突变的 envoplakin 和 vimentin 之间不存在相互作用，导致 NMR...

在本视频中，我们演示了噬菌体展示技术，用于分离表达对靶蛋白具有高亲和力的蛋白质的预制噬菌体。...

该视频演示了荧光波动光谱 （FFS） 研究蛋白质同源寡聚化的技术。使用 FFS...

该视频介绍了 BiFC-PALM（光激活定位显微镜和双分子荧光互补的组合）来评估蛋白质-蛋白质相互作用。BiFC 涉及两个荧光蛋白片段与两个相互作用的目标蛋白的融合。当两种蛋白质相互作用时，片段会靠近，这使得这两个部分能够聚集在一起并重建功能性荧光蛋白。单个荧光基团的荧光通过 PALM...

在本视频中，我们描述了荧光各向异性技术，用于研究荧光团标记的 Shwachman-diamond 综合征 （SBDS） 蛋白与延伸因子样 1 GTP 酶 （EFL1） 之间的相互作用。在用逐渐增加的 EFL1 浓度孵育 SBDS...

在本视频中，我们演示了细胞内核磁共振波谱技术，以研究未标记的过表达蛋白质和小分子之间的蛋白质-配体相互作用。在感兴趣的光谱区域出现一组额外的峰，逐渐取代原始峰，从而直观地证实了成功的配体-蛋白质相互作用。...

该视频演示了一种使用基于 QCM 生物传感器的 T7 噬菌体展示肽库生物淘选来研究蛋白质-药物相互作用的方法。对在 QCM...

该视频介绍了 SEC-MALS，它利用了尺寸排阻色谱 （SEC） 和多角度光散射 （MALS） 的功能。在 SEC-MALS 中，SEC 根据蛋白质或蛋白质复合物的大小分离蛋白质或蛋白质复合物，MALS...

在本视频中，我们展示了双分子互补亲和纯化...

在本视频中，我们描述了一种基于流式细胞术的竞争性结合测定法，以检测 CXC 趋化因子受体 4 （CXCR4） 与其荧光标记的天然配体 CXC 趋化因子配体 12 （CXCL12） 之间的相互作用，在靶向 CXCR4 的小分子存在下。用较低的小分子浓度孵育表达 CXCR4 的细胞可以在一定程度上结合...

该视频演示了基于报告基因检测的受体-配体相互作用检测。成功的受体-配体相互作用激活下游信号通路，导致细胞因子在溶液中作为分泌报告分子产生和释放，这可以通过 ELISA...

在本视频中，生物膜力探针 （BFP） 用于测量受体和配体之间的力。该技术可以通过监测破坏探针珠上偶联的 pMHC 与靶细胞上的 TCR...

该视频演示了研究 GTP 酶结合蛋白伴侣的竞争性检测。利用固定在磁珠上的核苷酸结合 GTP 酶蛋白，可以研究两个相互作用的蛋白质伴侣之间对 GTP...

在本视频中，我们演示了使用印有流感病毒株抗原亚型的微阵列载玻片检测多种人血清样品中抗体同种型的过程。...

在本视频中，我们演示了电泳迁移率变化测定法，以使用红外荧光标记的 DNA 探针检测蛋白质-DNA 相互作用。当蛋白质与 DNA...

在本视频中，我们演示了染色质免疫沉淀技术，通过对蛋白质结合的染色质片段进行选择性免疫沉淀，鉴定少突胶质细胞前体细胞基因组 DNA...

该视频介绍了有助于监测转录因子和 DNA 之间相互作用的高性能荧光各向异性。该检测通过测量荧光团标记的 DNA 的分子旋转或各向异性引起的极化程度来监测荧光团标记的 DNA...

该视频演示了细菌体内检测，以研究 RNA 结合蛋白 （RBP） 与 RNA 的相互作用。细菌细胞用两个质粒构建体转化 — 一个结合位点质粒编码含有 RBP 结合位点下游荧光报告基因的 mRNA，而 RBP 质粒在诱导剂的控制下表达 RBP 蛋白。在诱导剂介导的 RBP 产生增加后，RBP 与 mRNA...

在本视频中，我们演示了改良酵母单杂交检测，该检测试剂盒可检测与靶 DNA 相互作用的多种蛋白质。转化的酵母细胞包含报告基因上游的靶 DNA 序列。此外，它们表达转录因子蛋白。当蛋白质形成复合物并与靶 DNA...

在本视频中，我们演示了确定靶蛋白解旋酶活性以解开生物素标记的 dsRNA...

在本视频中，我们描述了免疫荧光方法，该方法可视化了 DNA 修复蛋白 γH2AX 和 53BP1 在照射细胞核中双链 DNA...

该视频演示了一种体外 RNA 沉降测定法，用于鉴定 RNA 结合蛋白 （RBP），它与 mRNA 中富含腺苷酸-尿苷酸的元件 （ARE） 序列相互作用。来自细胞裂解物的靶标 RBP 与 RNA 探针混合，形成 RNA-蛋白质复合物。利用 RNA...

在本视频中，我们描述了通过指数富集 （SELEX） 方法识别目标靶蛋白的特定 RNA 结合序列的配体系统进化。将蛋白质与大量随机 RNA 序列一起孵育，分离、PCR 扩增和测序蛋白质结合 RNA...

该视频介绍了一种使用单分子成像可视化融合蛋白凝聚物在特定位点的 DNA 分子上的组装的方法。这些缩合物是由于 LCD-LCD 和 LCD-DBD 相互作用而形成的，这允许 RNA 聚合酶 II...

该视频演示了差示扫描量热法 — 一种研究生物分子和配体之间相互作用的技术。通过对样品进行反复加热和冷却循环并获得热力学分析扫描来研究 DNA...

该视频演示了用于研究蛋白质-脂质相互作用的微尺度热泳。该检测通过量化荧光标记蛋白响应温度梯度的热泳运动来检测分子之间的相互作用。将荧光分子与不同浓度的非荧光脂质分子混合，将溶液中的分子混合物加载到毛细管中。对毛细管中的样品施加温度梯度，并检测并记录荧光分子在温度梯度中的移动。...

在本视频中，我们使用定量流式细胞术演示了蛋白质和人工磷脂囊泡之间的相互作用。荧光标记的蛋白质与荧光标记的磷脂囊泡的结合增加了平均荧光强度，这种增加通过流式细胞仪检测。...

该视频演示了一种耗散微重技术，用于研究蛋白质与脂质双层的结合。添加小的单层囊泡以覆盖微量天平的石英传感器表面。利用目标磷脂结合蛋白与双层的钙离子依赖性结合，监测传感器振荡频率的变化和振荡的耗散，以确定蛋白质-脂质双层结合的性质。...

在本视频中，我们使用 pH 调节测定法演示了微流控模式中的蛋白质-磷酸肌醇醇相互作用，使用标记在支撑脂质双层（称为微流控平台）的磷脂酰乙醇胺脂质上的 pH 敏感荧光染料。蛋白质与磷脂结合后 pH...